[发明专利]一种鱼类溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种鱼类溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗，其特征在于，利用鱼类溶藻弧菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株克隆出重链(V_H)和轻链(V_L)可变区基因，用(Gly₄Ser)₃组成的连接肽(linker)连接V_H和V_L，构建V_H-linker-V_L形式的单链抗体scFv基因，在大肠杆菌中表达，获得鱼类溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗，基因序列全长747碱基对，编码249个氨基酸，其基因序列和氨基酸序列如下：

1 cg gccgaggtgaag

A  E  V  K

15 ctgaaggagtctggggctgagctggtaaggcctgggacttcagtg

L  K  E  S  G  A  E  L  V  R  P  G  T  S  V

60 aaggtgtcctgcaaggcttctggatacgcctttactaattacttg

K  V  S  C  K  A  S  G  Y  A  F  T  N  Y  L

------------CDRH1-----

105 atagagtgggtaaagcagaggcctggacagggccttgagtggatt

I  E  W  V  K  Q  R  P  G  Q  G  L  E  W  I

----

150 ggagtgattaatcctggaagtggtggtactaactacaatgagaag

G  V  I  N  P  G  S  G  G  T  N  Y  N  E  K

----------------------CDH2---------------

195 ttcaagggcaaggcaacactgactgcagacaaatcctccagcact

F  K  G  K  A  T  L  T  A  D  K  S  S  S  T

-------

240 gcctacatgcagctcagcagcctgacatctgatgactctgcggtc

A  Y  M  Q  L  S  S  L  T  S  D  D  S  A  V

285 tatttctgtgcaagagggcggttcccccattactatgctatggac

Y  F  C  A  R  G  R  F  P  H  Y  Y  A  M  D

---------------CDRH3----------

330 tactggggtcaaggaacctcagtcaccgtgtcgtcgggtggaggc

Y  W  G  Q  G  T  S  V  T  V  S  S  G  G

--

375 ggcggcggctccggtggtggtggatccggtggtggtggttct gac

D

420 atccagatgacacagactccactctccctgcctgtcagtcttgga

I  Q M T Q T P L S L P V S L G

465 gatcaagcctccatctcttgcggatctagtcagagccttgtacac

D Q A S  I  S  C G S S Q S L V H

---------------CDRL1----

510 agtaatggaaacacctatttacattggtacctgcagaagccaggc

S  N G N T Y L H W Y L Q  K P G

----------------------

555 cagtctccaaagctcctgatctacaaagtttccaaccgattttct

Q S P K L L  I  Y K V S N R F S

---------CDRL2-------

600 ggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttc

G V P D  R  F  S  G  S  G  S  G T D  F

645 acactcaagatcagcagagtggaggctgaggatctgggagtttat

T L K I  S  R V E A  E D L  G V Y

690 ttctgctctcaaagtacacatgttccgctcacgttcggtgctggg

F  C S Q S T H V P L T  F G A G

---------CDRL3-----------

730 accaagctggagctgaaacgt750

T K L  E L  K R

其中，划线部分是互补决定区(CDR1、CDR2、CDR3)，斜体是特征性的半胱氨酸，方框内为连接肽序列。