[发明专利]一种应用于结核病快速诊断的糖芯片、其制备方法及采用其的结核病诊断试剂盒无效
申请号: | 201210185439.7 | 申请日: | 2012-06-07 |
公开(公告)号: | CN102707053A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 张舒林;余晓丽;孙战强 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 祖志翔 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 应用于 结核病 快速 诊断 芯片 制备 方法 采用 试剂盒 | ||
1.一种用于结核病快速诊断的糖芯片,其包括固相载体,其特征在于,所述糖芯片还包括结核分枝杆菌脂多糖类抗原探针,所述结核分枝杆菌脂多糖类抗原探针通过肟化反应被固定于所述固相载体上。
2.如权利要求1所述的糖芯片,其特征在于,所述结核分枝杆菌脂多糖提取自结核分枝杆菌H37Rv菌株。
3.如权利要求1所述的糖芯片,其特征在于,所述结核分枝杆菌脂多糖为脂多糖LAM和LM。
4.如权利要求1所述的糖芯片,其特征在于,所述固相载体是经过化学改性的硝酸纤维膜或微孔板。
5.如权利要求4所述的糖芯片,其特征在于,所述固相载体的化学改性是根据如下步骤进行:
(1)将固相载体用环氧硅烷/甲苯溶液浸润,形成环氧化物功能的单层膜;
(2)将上述得到的固相载体用α,ω-二胺-聚乙二醇(MW=2000)溶液处理,使固相载体上覆盖一层带伯氨基的聚乙二醇单层分子;
(3)将氨基化的固相载体置于叔丁氧羰基氨氧基乙酸、乙烯和N-羟基琥珀酰亚胺的磷酸缓冲液处理,洗涤后用HCl/醋酸处理,使伯氨基通过化学改性转换成羟胺。
6.一种制备权利要求1至5任一项所述的糖芯片的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取、纯化结核分枝杆菌细胞壁脂多糖类抗原;
(2)利用肟化反应的方法将脂多糖类抗原探针固定于经过化学改性的固相载体,制作成糖芯片。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述固相载体的化学改性是通过以下步骤进行:
(1)将固相载体用环氧硅烷/甲苯溶液浸润,以形成环氧化物功能的单层膜;
(2)将上述得到的固相载体用α,ω-二胺-聚乙二醇(MW=2000)溶液处理,使固相载体上覆盖一层带伯氨基的聚乙二醇单层分子;
(3)将氨基化的固相载体置于叔丁氧羰基氨氧基乙酸、乙烯和N-羟基琥珀酰亚胺的磷酸缓冲液处理,洗涤后用HCl/醋酸处理,使伯氨基通过化学改性转换成羟胺。
8.一种结核病检测试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1至5任一项所述的糖芯片。
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