[发明专利]一种猪流感灭活疫苗的效价测定方法

权利要求书

1.一种猪流感灭活疫苗的效价测定方法，包括如下步骤：

1)使用猪流感灭活疫苗免疫猪，免疫后21～28日后采血分离血清；

2)去除血清中的非特异性成分，得到待检血清；

3)将猪流感灭活抗原稀释，配制浓度为4 HA单位猪流感抗原稀释液；

4)将待检血清稀释，将血清稀释液与4 HA单位猪流感抗原稀释液、红细胞混合，进行血凝抑制实验，以完全抑制4 HA单位猪流感抗原的血清最高稀释度为HI效价。

2.根据权利要求1所述的猪流感灭活疫苗的效价测定方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

1)使用猪流感灭活疫苗免疫猪，免疫后21～28日后采血分离血清；

2)将血清与受体破坏酶（RDE）混合，37℃水浴去除血清中非特异性成分；

3)将血清移至56℃水浴30min灭活残留的RDE，加入鸡红细胞，20～25℃下吸附血清中残余的非特异性成分；

4)将去除了非特异性成分的血清离心，取上清，上清即为待检血清；

5)将猪流感灭活抗原进行稀释，之后加入鸡红细胞悬液，在血凝板震荡均匀后于20～25℃下静置20～30 min，以红细胞完全凝集的最高稀释倍数为血凝价；

6)根据测得的血凝价配制浓度为4 HA单位猪流感抗原稀释液；

7)将待检血清稀释，加入4 HA单位猪流感抗原稀释液和鸡红细胞，同时设置阴性对照，进行血凝抑制实验，以完全抑制4 HA单位猪流感抗原的血清最高稀释度为HI效价。

3.根据权利要求2所述的猪流感灭活疫苗的效价测定方法，其特征在于：步骤3）中，加入鸡红细胞使血清中红细胞的体积浓度为5%～20%。

4.根据权利要求2所述的猪流感灭活疫苗的效价测定方法，其特征在于：步骤5）和7）中，鸡红细胞的体积浓度为1%。