[发明专利]一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂

权利要求书

1.一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：由以下物质组成，

（a）从血液样品中的红细胞释放血红蛋白的溶解缓冲剂；

（b）能够切断糖化血红蛋白β链N基末端的糖化缬氨酸或糖化多肽片段的蛋白酶；

（c）能够氧化并消除样本中干扰物质的氧化剂；

（d）能够将血红蛋白变性并且能够加快蛋白酶反应速率的氧化剂；

（e）能够加快蛋白酶反应速率的加速反应剂；

（f）与物质a中能够切断糖化血红蛋白β链N基末端的糖化缬氨酸或糖化多肽片段进行氧化还原反应的果糖基氨基酸氧化酶；

（g）能够与产生的过氧化氢发生显色反应的显色剂；

（h）能够催化过氧化氢和显色剂发生显色反应的过氧化物酶。

2.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质a中的缓冲剂为TritonX-100、Tween-20、Brij35中的一种；添加的浓度为0.1%-1%的重量，室温下静置3-10分钟即可溶血完全。

3.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质b中的蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、蛋白酶K、猪胰蛋白酶、氨肽酶、嗜热菌蛋白酶、蛋白酶E、中性蛋白酶、弹性蛋白酶中的一种；蛋白酶的浓度范围为100-5000KU/L。

4.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质c中的氧化剂是戴斯马丁氧化剂或者高碘酸钠，其浓度范围为0.5-10mmol/L。

5.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述的物质d中的氧化剂为四唑鎓盐。

6.根据权利要求5所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述的四唑鎓盐是2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑盐、2-（4-碘苯基）-3-（2，4-二硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑盐、2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑盐、2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-苯基-2H-四唑盐、2，5-二苯基-3-（间甲苯基）四唑盐、2，5-二苯基-3-（对甲苯基）四唑盐、2，3-二苯基-5-（2-噻吩基）四唑盐、铁氰化钾、碘酸钾。其中优选2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑盐、2-（4-碘苯基）-3-（2，4-二硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑盐中的一种，其浓度范围为0.05-10mmol/L。

7.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质e中的加速反应剂为葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、正十二烷基-β-D-麦芽糖、亚硝酸钾、亚硝酸钠、硝基苯中的一种或多种混合物，其浓度范围为0.01-1mmol/L。

8.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质f中果糖基氨基酸氧化酶是纯化的或是重组产生的。

9.根据权利要求8所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述果糖基氨基酸氧化酶为作用于a-氨基被糖化的氨基酸或肽，同时催化产生过氧化氢的酶，其浓度为0.2-100KU/L。

10.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质h中的过氧化物酶为辣根过氧化物酶，其浓度范围为20-800KU/L。

11.根据权利要求1所述的一种测定糖化血红蛋白百分比的试剂，其特征在于：所述物质g中的显色剂为N-（羧甲基氨基羰基）-4，4’-双（二甲氨基）二苯基胺钠（DA-64）、10-（羧甲基氨基羰基）-3，7-双（二甲氨基）吩噻嗪盐（DA-67）、Trinder试剂中的一种，其浓度范围为0.02-10mmol/L。