[发明专利]N-乙酰半胱氨酸对中央记忆性T细胞的绝对数量在体外扩增上的应用

权利要求书

1.N-乙酰半胱氨酸对中央记忆性T细胞的绝对数量在体外扩增上的应用。

2.根据权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对中央记忆性T细胞的绝对数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述中央记忆性T细胞为CD4⁺ T或CD8⁺T细胞。

3.根据权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对中央记忆性T细胞的绝对数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述N-乙酰半胱氨酸的浓度为1 mmol/L~10 mmol/L。

4.根据权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对中央记忆性T细胞的绝对数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述T细胞的提取方法是先将外周成分血与含2% BSA和0.5% EDTA的PBS按1:4混合均匀；然后将稀释后的血液缓慢加入淋巴细胞分离液的上方，二者的比例为1:1；离心300×g 30 min；小心吸取单核细胞，置入另一离心管中，加入5倍体积的含0.5% BSA和2% EDTA 的PBS稀释，混合均匀后，300×g 15 min；重复上一步骤一次；孵育CD4⁺ T或CD8⁺T细胞阴选一抗，15 min；用10倍体积的含0.5% BSA和2% EDTA 的PBS稀释，混合均匀后，300×g 12 min；孵育带有磁珠的二抗，30 min；过柱进行细胞分选，得到CD4⁺ T或CD8⁺T细胞。

5.根据权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对中央记忆性T细胞的绝对数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述T细胞的培养方法是在5% CO₂、饱和湿度及37^oC条件下将5×10⁵个/孔的CD4⁺ T或CD8⁺T细胞置于1 mL含10%胎牛血清的RPMI1640中培养。