[发明专利]一种中药组合物制剂指纹图谱的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及到一种中药组合物制剂指纹图谱的测定方法。

背景技术

ZL 02146570.3公开了一种治疗糖尿病的药物组合物，临床上治疗Ⅱ型糖尿病口渴多饮、消谷易饥、尿多消瘦、倦怠乏力等症。该药物组合物由人参、黄精、苍术、苦参、茯苓、麦冬、制何首乌、地黄、山茱萸、黄连、佩兰等药味组成，组成成分较为复杂，制成制剂以后，控制产品质量时，对该中药组合物中尽量多的成分进行鉴别，有利于该药品的安全有效，质量稳定可靠。

超高效液相色谱（UPLC）是分离科学中的一个全新类别，UPLC借助于HPLC（高效液相色法）的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。

与传统的HPLC相比，UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍，它缩短了分析时间，同时减少了溶剂用量降低了分析成本。

超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发展是一个极大的促进。中药的组分复杂，分离困难等问题都可以通过超高效液相色谱法逐渐解决。在同样条件下，UPLC能分离的色谱峰比HPLC多出一倍还多。在同样条件下，UPLC的分辨率能够认出更多的色谱峰。

中药指纹图谱是指中药经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。指纹图谱应该具备指纹性，即：（1）专属性强。指所制订的指纹图谱应该是该中药所独有的、能与其它中药相区别的，其反映的化学信息是具有高度的选择性的；（2）稳定性好。即中药的指纹图谱应该是从某中药的多批次中归纳出的共性，图谱中的共有峰或特征峰应相对稳定；（3）重现性好。所制订的指纹图谱在规定条件下应能再现指纹特征（如共有峰数目、大小、位置等），其误差应在允许的范围内。只有这样，所制订的指纹图谱才具有实用价值，才可以有效控制药品的质量。

采用UPLC 指纹图谱方法控制药品质量具有灵敏、快速、简便、准确等特点，通过优选色谱条件测定药品制剂的指纹图谱，可以很好控制药品质量。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药组合物制剂的指纹图谱测定方法，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：人参42-160、黄精50-200、苍术30-100、苦参20-60、茯苓35-100、麦冬50-200、制何首乌35-100、地黄50-120、山茱萸50-200、黄连20-60、佩兰30-60、荔枝核75-150、淫羊藿30-60、知母30-100、丹参35-120、葛根50-200、地骨皮30-100；本发明指纹图谱测定方法采用超高压液相色谱法，色谱条件及测定方法如下：

色谱条件：色谱柱为C₁₈柱，柱温20-50℃，流速0.2-0.5mL.min^-1，检测波长203nm，流动相B为乙腈，D为0.1%磷酸；梯度洗脱：0～1min，4%～4%B；1～3min，4%～7.5%B；3～12min，7.5%～17%B；12～13min，17%～20%B；13～20min，20%～32%B；20～21 min，32%～40%B；21～25min，40%～56%B；25～29min，56%～90%B；29～35min，90%～90%B；在这里，流动相B百分比发生变化，流动相D的百分比同时作相应变化；

供试品溶液的配制：取所述中药组合物制剂1-3g，精密称定，加入60-85%甲醇25mL作为溶剂，称重，超声30-50min，放置室温，称重，用60-85%甲醇补足重量，混匀后离心，取上清液，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液；

测定法：精密吸取供试品溶液0.5μl，注入超高压液相色谱仪，记录色谱图，即得。

本发明指纹图谱测定方法色谱条件优选如下：色谱柱优选为Acquity UPLC BEH C₁₈，规格优选为2.1mm×100mm，1.7μm；柱温优选为40℃；流速优选为0.3 mL.min^-1；供试品溶液的配制：取所述中药组合物制剂1.5g，精密称定，加入80%甲醇25mL作为溶剂，称重，超声30-50min，放置室温，称重，用80%甲醇补足重量，混匀后离心，取上清液，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液。

本发明中药组合物制剂的指纹图谱测定方法，适用的中药组合物制剂原料药的重量比例优选为：