[发明专利]一种检测组氨酸标签重组蛋白的核酸适配体分子信标探针及其检测方法有效
| 申请号： | 201210193143.X | 申请日： | 2012-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN102719430A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 谭蔚泓;张晓兵;谭晓红;丁玎 | 申请（专利权）人： | 湖南大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人： | 马强 |
| 地址： | 410082 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 组氨酸 标签 重组 蛋白 核酸 适配体 分子 信标 探针 及其 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测组氨酸标签的核酸适配体分子信标探针，其特征在于，所述探针包含SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列；SEQ ID NO.1所示序列的3’端与SEQ ID NO.2所示序列的5’端通过PEG36桥联；SEQ ID NO.1所示序列5’端修饰有荧光基团FAM；SEQ ID NO.2所示序列3’端修饰有淬灭基团Dabcy1。
2.如权利要求1所述的核酸适配体分子信标探针，其特征在于，当所述核酸适配体分子信标探针未与组氨酸标记蛋白结合时，探针为茎环结构，探针的FAM基团的荧光信号被Dabcy1基团猝灭；当所述核酸适配体分子信标探针与组氨酸标记蛋白结合时，探针的茎环结构改变，荧光基团FAM远离猝灭基团Dabcy1，使得FAM基团的荧光信号恢复。
3.一种基于权利要求1或2所述的核酸适配体分子信标探针检测细胞裂解物中组氨酸标签重组蛋白的方法，包括如下步骤：
（1）制备核酸适配体分子信标探针：在ABI DNA synthersizer上合成权利要求1所述的核酸适配体分子信标探针；
（2）将待测细胞裂解物加入到含有步骤（1）所述探针的缓冲溶液中，通过检测探针荧光强度的变化来检测细胞裂解物中的组氨酸标记蛋白。
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