[发明专利]一种西仑吉肽的固相合成方法

权利要求书

1.一种西仑吉肽的固相合成的方法，包括以下步骤：

1)由替代度为0.4～0.9mmol/g的Wang Resin和Fmoc-L-Asp-OtBu反应制备Fmoc-L-Asp(OtBu)-Wang Resin；

2)通过固相合成法依次偶联剩余4个Fmoc氨基酸，得到西仑吉肽前体肽A-Wang Resin；

3)在西仑吉肽前体肽A-Wang Resin中，分别加入脱Fmoc和OtBu的试剂，得到西仑吉肽前体肽B-Wang Resin；

4)加入环化试剂，反应得西仑吉肽-Wang Resin；

5)裂解，纯化，冷冻干燥得到纯西仑吉肽。

2.根据权利要求1所述的西仑吉肽的固相合成的方法，其特征在于，Fmoc-L-Asp-OtBu和Wang Resin在DIC+HOBT+DMAP作用下反应制备Fmoc-L-Asp(OtBu)-Wang Resin。

3.根据权利要求1所述的西仑吉肽的固相合成的方法，其特征在于，固相合成西仑吉肽前体肽A-Wang Resin，其中Fmoc-氨基酸分别为Fmoc-Gly-OH、Fmoc-L-Arg(Mtr)-OH、Fmoc-N-Me-L-Val-OH和Fmoc-D-Phe-OH。

4.根据权利要求1-3任意一项权利要求所述的西仑吉肽的固相合成的方法，其特征在于，使用的溶剂均为无水DMF、DCM、CH₃OH，偶联剂为C+D+E，其中C为HOAt或HOBt，D为HBTU或HATU或TBTU，E为DIEA，脱氨基上Fmoc保护基为体积比为20％～25％的哌啶-DMF(DCM)溶液，脱OtBu的试剂为含催化量TFA的PhOH溶液。

5.根据权利要求1所述的西仑吉肽的固相合成的方法，其特征在于，合成西仑吉肽-Wang Resin，其中环化试剂为DPPA+DIEA或DPPA+NMM或DIC+HOBT或C+D+E，其中C为HOAt或HOBt，D为HBTU或HATU或TBTU，E为DIEA，脱侧链保护基和裂解试剂为TFA/H₂O/TIS。

6.根据权利要求1-5任意一项权利要求所述的西仑吉肽的固相合成的方法，其特征在于，氨基酸活化温度为0～5℃，偶联、脱保护基、裂解和环化反应温度均为0～30℃。