[发明专利]一种植物中硫代葡萄糖苷总量的测定方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种植物中硫代葡萄糖苷总量的测定方法，属于食品生物技术领域。

二、背景技术

硫苷是十字花科植物中普遍存在的一类次生代谢产物，食用富含硫代葡萄糖苷(硫苷)的十字花科蔬菜可预防胰腺癌、肺癌及直肠癌等多种癌症的发生。这一功能主要与硫苷的水解产物一异硫氰酸盐类物质有关。植物组织遭受损伤后，硫苷与黑芥子酶接触，水解产生异硫氰酸盐、硫氰酸盐、腈类和恶唑烷等物质。

目前，国际上硫苷的测定普遍采用X射线荧光分析法(XRF)(ISO 9167-2：1994(E).Rapeseed-Determination of glucosinolates content.Part 2：Method using X-ray fluorescence spectrometry，5 pp.)和高效液相色谱法(HPLC)(ISO 10633-1：1995(E).Oilseed residues-Determination of glucosinolates content.Part 1：Method using high-performance liquid chromatography，9 pp.)，虽然这两种方法精确度高，但其设备昂贵，样品前处理较复杂且耗时，难以普遍应用。此外，硫苷种类有120多种，而可购得的硫苷标准品仅sinigrin和glucotropaeolin两种，故HPLC法还要对每种硫苷进行质谱鉴定，进而提高了实验难度。其他测定硫苷的方法有硫酸-百里酚法(Tholen，J.T.，Shen，S.，TruscottS，R.J.W.The Thymol Method for Glucosinolate Determination[J].Journal of the Science of Food and Agriculture，1989，49：157～165.)，硫酸根离子沉淀法(Mcghee，J.E.，Kirk，L.D.，Mustakas，G.C.Methods for Determining Thioglucosides in Crambe abyssinica.J.AOCS.889(42)，1965.)，葡萄糖释放一酶鉴定法(ISO/TC 34/SC2：Rapeseed-Determination of glucosinolates Content-Part 2：Spectrometric Method for Total Glucosinolates by Glucose Release.)以及酶联免疫法(Doorn，H.E.，Holst，G.G.C.Kruk，v.N.C.M.E.Raaijmakers，Postma，E.Quantitative Determination of the Glucosinolates Sinigrin and Progoitrin by Specific Antibody ELISA Assays in Brussels Sprouts[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry.1998，46：793～800.)，这些方法都有一定的局限性，如样品中硫酸根离子及葡萄糖的干扰，硫酸根离子沉淀法需要高温煅烧且测定时间长，酶联免疫法的实验操作复杂、成本高。此外，上述方法均需利用外源酶降解硫苷，酶难以获得且硫苷降解不彻底。因此，建立一种简单、快速、精密的总硫苷测定方法，对富含硫苷的十字花科蔬菜质量控制和综合开发意义重大。