[发明专利]核壳结构球形致孔剂及其用于制备三维细胞支架

权利要求书

1.一种核壳结构球形致孔剂，其特征是：所述的致孔剂其核为具有较高的强度的碳酸钙/海藻酸钙复合物，壳为具有弹性的海藻酸钙水凝胶，该致孔剂是通过下述方法获得，该方法具体步骤如下：

第一步 在砂磨机中配制碳酸钙/海藻酸钠悬浮液；

第二步 将第一步制得的悬浮液吸入注射器中，放置于注射泵上，在高压静电体系中的条件为:电压在8-10kv，电极间距离为2cm；流速为10mL/h，针头内径为0.55mm，将液滴滴入固化液氯化钙浓度为20%，固化交联完全后，得到碳酸钙/海藻酸钙复合微球，即致孔剂微球的核，其粒径在200-1000μm；

第三步 将第二步制得的微球过滤，用蒸馏水反复冲洗数次后，用无水乙醇除去微球表面的多余的水分，将微球置于自制的沸腾干燥装置中，用压缩空气干燥至无水，筛分微粒，得到需要粒径的微粒；

第四步 称取第三步得到需要粒径的微粒，置于盛有EDTA溶液的烧杯中，反应至设定时间后，迅速过滤致孔剂，并转入20%的氯化钙溶液中浸泡1h，过滤，用蒸馏水反复冲洗至无游离钙离子，即获得核壳结构的致孔剂。

2.如权利要求1所述的核壳结构球形致孔剂用于制备三维细胞支架的方法，其特征是具体步骤为：

第一步 配制PDLLA支架溶液；

第二步 将支架制备溶液、模具、致孔剂等置于三氯甲烷/二氧六环(V/V=5:2)蒸汽饱和的密闭操作箱内，在操作箱内，将核壳致孔剂与支架溶液按1:1(V/V)混合均匀，转入支架制备模具内，用分布有微孔的压滤板对混合物施压；

第三步 将致孔剂/支架溶液复合物连同磨具迅速置于-45 ℃低温环境，冷冻、固化定型18h及以上；

第四步 迅速脱模后用冷冻干燥机干燥7 h；

第五步 将复合物浸入蒸馏水中30min；

第六步 将步骤⑤中的复合物取出用刀切去上下面，浸泡在用2mol/L 的EDTA溶液(pH=10)溶解致孔剂，每12h更换一次EDTA溶液，如此反复更换三次；

第七步 取出三维支架，用蒸馏水冲洗，充分干燥后获得多孔PDLLA支架。