[发明专利]一种提取和分离虫草素的方法

权利要求书

1.一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）超低温粉碎：将雪花冬虫夏草原料采用低温粉碎机以液氮为介质在温度为-196℃以下粉碎，得到粉末；

（2）虫草素的提取：将步骤（1）得到的粉末和蒸馏水以重量比1:5-1:20混合，超声波提取、离心过滤后，得到提取液；

（3）分离：将步骤（2）得到的提取液与大孔树脂混合平衡，温度20℃，经洗脱液洗脱树脂柱，收集流出液冻干；

（4）纯化：用反向高效液相色谱将步骤（3）得到的流出液进行纯化，得到虫草素的浓缩物。

2.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（1）中雪花冬虫夏草为雪花冬虫夏草子实体或雪花冬虫夏草菌丝体。

3.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（1）的温度为-196℃。

4.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（2）是在超生频率20-30KHz，输出功率100W-200W条件下进行超生波提取。

5.根据权利要求1或4所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中的超声波提取时间为15-30min。

6.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（3）中的提取液的上样量为大孔树脂体积的10倍，提取液的吸附流速为大孔树脂吸附流速的1-3倍。

7.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（3）中的洗脱液为浓度为20-50%的乙醇，洗脱液为5-10倍树脂柱体积，流速2-4BV/hr。

8.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（4）中反向高效液相色谱条件为：

色谱柱：20×150mm×5um的C18制备柱，

柱温：20℃，

流动相组成：10%甲醇，0.05M磷酸缓冲液，pH7.2，

流速：1ml/min，

检测波长：260nm，

进样量：200ul。

9.根据权利要求1所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的步骤（4）用反向高效液相色谱将步骤（3）得到的流出液进行纯化，经纳滤脱盐、干燥得到虫草素的浓缩物。

10.根据权利要求9所述的一种提取和分离虫草素的方法，其特征在于，所述的纳滤脱盐用的复合膜为截留分子量200Da的NF-1812卷式聚酰胺。