[发明专利]一种诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法

权利要求书

1.一种诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将大豆幼苗在MSB5培养基上培养后，进行切割获取下胚轴外植体；

（2）对下胚轴外植体的形态学上端部分用苄基腺嘌呤溶液浸泡处理；

（3）将步骤（2）处理后的下胚轴外植体接种至MSB5培养基上培养。

2.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（1）和步骤（3）所述MSB5培养基中苄基腺嘌呤的浓度为0。

3.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（2）的浸泡处理时间为20-40 min。

4.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（2）的苄基腺嘌呤溶液浓度为30mg/L。

5.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（2）浸泡处理后清除残留在下胚轴外植体表面的苄基腺嘌呤溶液。

6.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（2）的苄基腺嘌呤溶液配制方法为：称取一定量的苄基腺嘌呤粉末，用1 mol/L NaOH溶解，再用去离子水定容，配制成30 mg/L的苄基腺嘌呤溶液；采用1 mol/L HCl调整苄基腺嘌呤溶液的pH至5.8-6.0。

7.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（1）和步骤（2）的培养条件均为：室温为25℃、光照强度为2000lx、光照时间为每天12小时。

8.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（1）的培养时间为5天。

9.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（1）和步骤（3）的MSB5培养基中含有：MS培养基配方的无机成分、B5培养基配方的有机成分、25 g/L蔗糖、100 mg/L肌醇、300 mg/L蛋白胨、7 g/L琼脂，pH为5.8-6.0。

10.如权利要求1所述的诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法，其特征在于步骤（2）中浸泡处理使用的装置为：采用一块用于核苷酸片段扩增的4 cm×6 cm PCR板，整齐的切掉PCR板底部的小管，保留四个角上的小管作支架，放在有盖的培养皿中。