[发明专利]一种多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法的建立方法及其应用有效
申请号: | 201210207835.5 | 申请日: | 2012-06-21 |
公开(公告)号: | CN103513031A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | 张许科;孙进忠;白朝勇 | 申请(专利权)人: | 普莱柯生物工程股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人: | 吴大建;欧颖 |
地址: | 471003 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多杀性巴氏 杆菌 间接 血凝 试验 建立 方法 及其 应用 | ||
1.一种多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法的建立方法,包括:
步骤A:测定多杀性巴氏杆菌荚膜抗原中荚膜多糖的含量;
步骤B:使用不同荚膜多糖含量的多杀性巴氏杆菌荚膜抗原致敏绵羊红血球测定同一血清样品的IHA效价,并确定最高血清IHA效价所对应的荚膜多糖含量;
步骤C:基于最高血清IHA效价所对应的荚膜多糖含量确定间接血凝试验法中抗原稀释度,并建立多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:还包括在步骤A之前进行建立初级多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法的步骤。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:在建立初级多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法的步骤中,其结果判定终点为100%凝集。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:间接血凝试验是在室温条件下反应60min或在37℃条件下反应30min。
5.一种根据权利要求1~4中任意一项所述的方法所建立的多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法在多杀性巴氏杆菌疫苗效力检验中的应用,包括:
步骤1:进行不同剂量的动物免疫及攻毒试验;
步骤2:测定免疫后多杀性巴氏杆菌IHA效价,并建立多杀性巴氏杆菌IHA效价与强毒攻毒保护率之间的平行关系;
步骤3:基于多杀性巴氏杆菌IHA效价与强毒攻毒保护率之间的平行关系,确定以多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法替代疫苗效力检验中的免疫后强毒攻毒的方法;
其中,免疫后多杀性巴氏杆菌IHA效价采用根据权利要求1所述的方法所建立的多杀性巴氏杆菌间接血凝试验法来测定。
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