[发明专利]β-兴奋剂类半抗原及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201210208642.1 申请日: 2012-06-19
公开(公告)号: CN103508910A 公开(公告)日: 2014-01-15
发明(设计)人: 何方洋;陶光灿;冯才伟;吴鹏;赵正苗;崔廷婷;李勇;张禹 申请(专利权)人: 北京勤邦生物技术有限公司
主分类号: C07C223/02 分类号: C07C223/02;C07C221/00;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K14/75;C07K14/47;C07K1/113;C07K16/44;G01N33/577
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 102206 北京市昌平*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 兴奋剂 半抗原 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种β-兴奋剂类半抗原,其特征在于分子结构式为:

2.一种制备权利要求1所述β-兴奋剂类半抗原的方法,其特征在于包括如下步骤:

1.0g沙丁胺醇,溶入20ml N,N-二甲基甲酰胺中,然后加入10%摩尔当量的四甲基哌啶氧化物、10%摩尔当量的四丁基氯化铵和20ml 0.5mol/L的NaHCO3水溶液,室温下搅拌30min后,加入1.1摩尔当量的N-氯代琥珀酰亚胺,室温反应2~5h后,除去大部分溶剂,乙酸乙酯萃取,洗涤,干燥,除去溶剂后柱层析纯化,得到白色固体沙丁胺醇单氧化物,即为β-兴奋剂类半抗原。

3.一种β-兴奋剂类抗原,其特征在于由权利要求1所述的β-兴奋剂类半抗原与载体蛋白偶联得到。

4.一种制备权利要求3所述的β-兴奋剂类抗原的方法,其包括如下步骤:

取7mg半抗原,溶解于1ml N,N-二甲基甲酰胺中,取碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺各30mg用0.2ml水充分溶解后加入半抗原溶液中,室温下搅拌24h,即可得到反应液A;称取载体蛋白50mg,使之充分溶解在3.8ml PBS(pH 7.2)中,将反应液A逐滴缓慢滴加到蛋白溶液中,并于室温下搅拌24h,用0.01mol/L PBS 4℃透析3d,每天换3次透析液,以除去未反应的小分子物质,即得到β-兴奋剂类抗原;分装,于-20℃保存备用。

5.一种β-兴奋剂类抗体,其特征在于由权利要求3所述的β-兴奋剂类抗原免疫动物制备得到。

6.如权利要求5所述的β-兴奋剂类抗体,其特征在于所述抗体为β-兴奋剂类单克隆抗体。

7.由权利要求6所述的抗体制备的β-兴奋剂类酶联免疫试剂盒。

8.权利要求7所述的β-兴奋剂类酶联免疫试剂盒在检测动物源性样品中β-兴奋剂类残留的应用。

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