[发明专利]敲除脯氨酸合成途径提高钝齿棒杆菌精氨酸产量的方法

权利要求书

1.一种脯氨酸合成关键酶缺失型基因ΔproB，其特征是：以保藏编号为CCTCC NO：M208133的C.crenatum SYPA菌株DNA为模板，通过重叠PCR法将获得来自钝齿棒杆菌SYPA的脯氨酸合成关键酶基因proB中的了352个核苷酸碱基缺失；重叠PCR的引物序列为：第一轮PCR引物序列：

PproBF EcoRI 5’-CGCGAATTCATGCGTGAGCGCATCTCCAACGC

PproBR SalI 5’-CGCGTCGACTTACGCGCGGCTGGCGTAGTTGGAC

第二轮PCR引物序列：

PΔproB R 5’-CCCATCCACTAAACTTAAACACGCACGATCACGCTTTCCTGCATC

PΔproB F 5’-TGTTTAAGTTTAGTGGATGGGGTGTCTGCTGCACGTTTGGCT。

2.一株重组钝齿棒杆菌SYPA 5-5ΔproB，其特征是将权利要求1所述的缺失ΔproB基因利用电转化的方法通过同源重组整合至钝齿棒杆菌SYPA 5-5染色体中获得。

3.一种利用权利要求2中所述的重组钝齿棒杆菌发酵生产精氨酸的方法，其特征在于该菌株的脯氨酸的合成显著降低，L-精氨酸的产量显著提高。