[发明专利]用于鉴定疣粒野生稻的特异性分子标记及其应用

权利要求书

1.用于鉴定疣粒野生稻的特异性分子标记，其特征在于，其位于禾本科植物单拷贝核基因TPI序列上，它的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

2.用于鉴定疣粒野生稻的特异性PCR引物，其特征在于，包括正向引物F5'-CAGTGGTGGAGCCAGAAATT-3'和反向引物R5'-GCTTAATCAGGGGCAGAGGC-3'。

3.权利要求1所述的特异性分子标记在鉴定疣粒野生稻中的应用，其包括步骤：

1）提取待测植株的基因组DNA；

2）以待测植株的基因组DNA为模版，利用权利要求2所述引物F和R，进行PCR扩增反应；

3）检测PCR扩增产物，如果能够扩增出如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的产物，则待测植株为疣粒野生稻。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2）中PCR反应使用的扩增体系以25μl计为：30ng/μl模板DNA 1μl，10pmol/μl引物F和R各1μl，2.5mmol/L dNTP mix2.0μl，5U/μL Taq DNA聚合酶0.3μl，10×PCR反应缓冲液2.5μl，25mmol/L MgCl₂2μl，余量为水。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤2）中PCR反应使用的条件为：94℃ 5分钟；94℃ 30秒，60℃ 30秒，72℃ 30秒，24个循环；72℃ 10分钟。

6.含有权利要求2所述引物的用于检测疣粒野生稻的试剂盒。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液中的一种或多种。

8.根据权利要求6或7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。

9.权利要求1所述用于鉴定疣粒野生稻的特异性分子标记在植物分子标记辅助育种中的应用。