[发明专利]可用于检测肌红蛋白的核酸适体、筛选用微流控芯片及其筛选方法和应用

权利要求书

1.一种可用于检测肌红蛋白的核酸适体，所述核酸适体的核苷酸序列包括以下序列1～序列5中的任意一条序列所示的DNA片段：

序列1：

5’- GACATCTATCGCCTCGATTTCCTTTGGTGAGATCGGCTCC-3’；

序列2：

5’- CCCTCCTTTCCTTCGACGTAGATCTGCTGCGTTGTTCCGA-3’；

序列3：

5’- ACGCACAATTCCTTGTCCAATTAGGAAATTCTACGCGGAT-3’；

序列4：

5’- CGAGTACTTCTTTGCTAGTTCGCGAGATACGTTGGCTAGG-3’；

序列5：

5’ - TTCCTTGTCCAATTAGGAA-3’。

2.根据权利要求1所述的可用于检测肌红蛋白的核酸适体，其特征在于：所述核酸适体的核苷酸序列上的某一位置被磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化或同位素化。

3.根据权利要求1或2所述的可用于检测肌红蛋白的核酸适体，其特征在于：所述核酸适体的核苷酸序列上结合有生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料或酶标记。

4.一种可用于检测肌红蛋白的核酸适体衍生物，所述衍生物包括以下四种中的任意一种：

（1）将权利要求1或2或3中所述核酸适体任意位置上的碱基A、T、G或C置换成稀有碱基甲基化嘌呤、二氢尿嘧啶或次黄嘌呤后，得到的核酸适体衍生物；

（2）权利要求1或2或3中所述核酸适体的核苷酸序列的骨架衍生出的硫代磷酸酯骨架； 

（3）权利要求1或2或3中所述核酸适体改造成的肽核酸；

（4）权利要求1或2或3中所述核酸适体改造成的锁核酸。

5.一种可用于筛选核酸适体的微流控芯片，所述微流控芯片包括进样口、出样口和连接二者的进样流道，其特征在于：所述进样流道上设有两个收缩段以形成两个狭窄流道，两个收缩段将进样流道分隔成前流道、中流道、后流道三个流段，所述前流道中填充至少上千个表面修饰有反筛蛋白的反筛蛋白修饰微珠以形成反筛单元，所述中流道中填充至少上千个表面修饰有正筛蛋白的正筛蛋白修饰微珠以形成正筛单元，所述反筛蛋白修饰微珠的粒径大于连通所述前流道和中流道的狭窄流道的宽度，所述正筛蛋白修饰微珠的粒径大于连通所述中流道和后流道的狭窄流道的宽度。

6.根据权利要求5所述的微流控芯片，其特征在于：所述微流控芯片上还另设有洗脱液进液口和洗脱液流道，所述洗脱液流道一端连接所述洗脱液进液口，另一端则交汇于所述中流道上使所述洗脱液流道和进样流道连通。

7.根据权利要求5或6所述的微流控芯片，其特征在于：所述微流控芯片为筛选权利要求1所述的核酸适体的微流控芯片，所述反筛蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、C反应蛋白中的至少一种，所述正筛蛋白为肌红蛋白。