[发明专利]一种人工锌指核酸酶表达载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201210225140.X | 申请日： | 2012-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN102732560A | 公开（公告）日： | 2012-10-17 |
| 发明（设计）人： | 袁玉国;成勇 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 人工 核酸酶 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种人工锌指核酸酶表达载体，其特征在于通过下述方法构建得到：将SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示序列，分别插入到载体pMLM290、pMLM292上的Xba l/BamH I位点而获得。
2.一种人工锌指核酸酶表达载体的构建方法，其特征在于，将SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示序列，分别插入到载体pMLM290、pMLM292上的Xba l/BamH I位点而获得。
3.如权利要求2所述的人工锌指核酸酶表达载体的构建方法，包括以下步骤：人工合成编码左右侧锌指蛋白域的基因序列，左右侧锌指蛋白域的基因序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，然后分别用Xba l/BamH I双酶切上述人工合成基因片段，用凝胶回收试剂盒回收酶切产物片段，然后将回收片段分别插入到载体pMLM290/292上的Xba l/BamH I位点上，构建成一对表达锌指核酸酶的质粒载体。
4.权利要求1所述人工锌指核酸酶表达载体在突变转基因细胞或转基因动物中的增强绿色荧光蛋白标记基因中的应用。
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