[发明专利]一个特异追踪簇毛麦6VS染色体的分子标记及其用法无效
申请号: | 201210226122.3 | 申请日: | 2012-07-03 |
公开(公告)号: | CN102925544A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 别同德;何华纲;张伯桥;吴宏亚 | 申请(专利权)人: | 江苏里下河地区农业科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 225007 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一个 特异 追踪 簇毛麦 vs 染色体 分子 标记 及其 用法 | ||
1.一个特异追踪簇毛麦6VS染色体的分子标记及其用法,其特征在于它是根据普通小麦bin-Map图谱第6部分同源群短臂的EST序列BG263579为模板设计得到的,标记引物扩增出的一段381bp的DNA条带位于簇毛麦6VS染色体,可以特异地追踪6VS染色体及其控制的抗小麦白粉病性状,标记引物序列为:
6VS-381 F:5’-CCAGTCGGAGAGGATCTCAA-3’
6VS-381 R:5’-TGGGCCTCTTGATCTTGACT-3’。
2.根据权利要求1所述的一个特异追踪簇毛麦6VS染色体的分子标记及其用法,其使用方法为:(一)PCR反应体系:10μL反应体系中含约10~20ng模板DNA,1×PCR buffer,1.5mmol L-1MgCl2,200mmol L-1dNTP,左右引物终浓度各为0.2μmol L-1,0.5U Taq DNA聚合酶,用无菌蒸馏水补充反应体系至10μL;(二)PCR反应程序:94℃预变性3分钟;94℃变性30秒,60℃退火30秒,72℃延伸45秒,32个循环;72℃延伸10分钟;4℃保存;(三)PCR产物检测:PCR扩增产物在8%非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离,用银染法染色。
3.根据权利要求1所述的一个特异追踪簇毛麦6VS染色体的分子标记及其用法,其特征在于它在追踪以T6AL.6VS易位系为亲本的抗小麦白粉病性状时,凡是扩增出381bp条带的材料,都含有小麦-簇毛麦T6AL.6VS易位染色体,并对白粉病表现高抗;凡是不能扩增出381bp条带的材料,都不具有T6AL.6VS易位染色体,相应丢失由6VS染色体控制的白粉病抗性。
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