[发明专利]检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒

权利要求书

1.检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于包括HER2基因PCR反应液、ACTB基因PCR反应液、Taq酶系、对照品和包装物；

所述HER2基因PCR反应液由PCR反应缓冲液、HER2基因特异性上游引物、HER2基因特异性下游引物和EVA Green荧光染料组成；

所述ACTB基因PCR反应液由PCR反应缓冲液、ACTB基因特异性上游引物、ACTB基因特异性下游引物和EVA Green荧光染料组成；

所述HER2基因特异性上游引物F序列为：

5’-GTCCGTCCTACAACTACCTTTCTACGGAC-3’；

所述HER2基因特异性下游引物R序列为：

5’-TGAGAAGGGCTTGCTGCACTTCTCA-3’；

所述ACTB基因特异性上游引物F序列为：

5’-CAGGATTCCTGGGCATGGAGTCCTG-3’；

所述ACTB基因特异性下游引物R序列为：

5’-CGCCAACAGACAGC ACTGTGTTGGCG-3’；

其中，引物5’端和3’端带有下划线的碱基为参与形成引物内双链结合区的碱基；

所述PCR反应缓冲液由100mM Tris-HCL、50mM KCL、10mM MgSO₄、50mM（NH₄）₂S0₄和25mM dNTPs组成。

2.如权利要求1所述的检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述HER2基因特异性上游引物的浓度、HER2基因特异性下游引物的浓度、ACTB基因特异性上游引物的浓度和ACTB基因特异性下游引物的浓度均为50μM。

3.如权利要求1所述的检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述Taq酶系采用热启动Taq酶，每反应用量为1U。

4.如权利要求1所述的检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述对照品采用MCF-7细胞株cDNA和无模板对照品。

5.如权利要求1所述的检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述包装物采用瓶或管。