[发明专利]葡萄溃疡病菌快速检测引物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一对葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum菌种快速分子检测引物及其应用。

背景技术

葡萄溃疡病（Grape Botryosphaeriaceae Canker）是由葡萄座腔菌科（Botryosphaeriaceae）真菌侵染引起的一种病害，近年来在世界范围内危害日益加重，在埃及、美国、匈牙利、意大利、葡萄牙、西班牙、南非和中国等14个国家均有发生并造成了严重的损失。目前，已知葡萄座腔菌科中的15个种能够引起该病害（Auger J,Esterio M,Ricke G，et al.Black dead arm and basal canker of Vitis vinifera cv.Red Globe caused by Botryosphaeria obtusa in Chile[J].Plant Disease.2004,88(11):1286.Niekerk J M,Fourie P H,Hallenn F,et al.Botryosphaeria spp.as grapevine trunk disease pathogens[J].Phytopathologia Mediterranea.2006,45(4):43-54.U Rbez-Torres J R,Peduto F,Striegler R K,et al.Characterization of fungal pathogens associated with grapevine trunk diseases in Arkansas and Missouri[J].Fungal Diversity.2012:1-21.U Rbez-Torres J R,Gubler W D.Pathogenicity of Botryosphaeriaceae species isolated from grapevine cankers in California[J].Plant Disease.2009,93(6):584-592.），在我国已发现并报道的葡萄溃疡病病原菌有Botryosphaeria dothidea、Lasiodiplodia theobromae和Diplodia seriata三个种（Li X H,Yan JY，Kong F F,et al.Botryosphaeria dothidea causing canker of grapevine newly reported in China[J].Plant Pathology.2010,59(6):1170.Yan J Y，Peng Y L,XieY，et al.First Report of Grapevine Trunk Disease Caused by Botryosphaeria obtusa in China[J].Plant Disease.2011,95(5):616.Yan J Y，Li X H,Kong F F,et al.Occurrence of Grapevine Trunk Disease Caused by Botryosphaeria rhodina in China[J].Plant Disease.2011,95(2):219.Yan JY，XieY，Yao S W，et al.Characterization of Botryosphaeria dothidea,the causal agent of grapevine canker in China[J].Australasian Plant Pathology.2012,41:351-357.）。

现阶段对于病原菌真菌的鉴定，以常规的形态学鉴定为主，但由于葡萄溃疡病菌种类繁多且种间形态差异较小，使得传统鉴定方法耗时耗力，迫切需要现代分子技术手段解决该问题。近年来，以聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction,PCR）技术为平台的病原生物分子检测技术，已被广泛应用于动植物病害的诊断及病原菌的鉴定。但在葡萄溃疡病菌检测方面,国内至今还未有分子检测技术的系统研究。

葡萄溃疡病菌的快速检测技术，有助于了解我国葡萄溃疡病菌的种群分布，对葡萄溃疡病的有效防治及葡萄抗病品种的选育等方面有指导作用。

发明内容

本发明的目的是提供一对葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum菌种特异性分子检测引物以及特异性强、灵敏度高、易于操作、结果可靠的葡萄溃疡病菌的快速分子检测方法。