[发明专利]一种尖吻蝮蛇溶栓酶及其制备方法和应用无效
申请号: | 201210229427.X | 申请日: | 2012-07-03 |
公开(公告)号: | CN103184207A | 公开(公告)日: | 2013-07-03 |
发明(设计)人: | 王锡娟;孙狄 | 申请(专利权)人: | 北京康辰药业有限公司 |
主分类号: | C12N9/68 | 分类号: | C12N9/68;C12N15/57;A61K38/48;A61P9/10;A61P7/02;A61P11/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
地址: | 100150 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蝮蛇 溶栓酶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种尖吻蝮蛇溶栓酶,其氨基酸序列是:
1)SEQ ID No.1所示的氨基酸序列;或
2)SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸且具有同等活性的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述溶栓酶的基因。
3.权利要求1所述溶栓酶的制备方法,其包括如下步骤:
1)预处理蛇毒冻干粉;
2)洗脱预处理后的蛇毒溶液,收集NaCl溶液的洗脱液;
3)步骤2)中的洗脱液经浓缩、透析去除NaCl;
4)再次洗脱步骤3)中透析后的溶液,收集NaCl溶液的洗脱液;
5)步骤4)中的洗脱液经浓缩、透析去除NaCl;重复步骤4)和5)一次以上。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤1)蛇毒预处理的方法是将蛇毒用预冷的0.01M pH7.0~7.5PBS溶解,溶解液经离心、透析或超滤浓缩,得蛇毒浓缩液。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤2)和步骤4)采用0.01M pH7.0~7.5的PBS预平衡DEAE-Sephrose FF层析柱,用含0~1M NaCl的0.01M pH7.0~7.5的PBS分段洗脱。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤2)中的所述NaCl溶液为洗脱峰为0.06M的NaCl溶液。
7.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤4)中的所述NaCl溶液为洗脱峰为0.085M的NaCl溶液。
8.如权利要求2~7任一项所述的方法,其特征在于,还包括步骤6)冷冻干燥。
9.权利要求1所述溶栓酶在制备治疗脑梗塞、冠心病、肺心病或下肢静脉血栓的药物中的应用。
10.一种治疗血栓的药物,其特征在于,其含有权利要求1所述的溶栓酶。
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