[发明专利]一种均相免疫分析方法

权利要求书

1.一种均相免疫分析方法，选自以下任一：

方法一，包括下列步骤：

采用均相夹心免疫分析法，将含有待测物的样本与两种被纳米贵金属标记的抗体，在均相的免疫反应体系中进行夹心免疫反应，通过散射相关光谱技术获得表征反应液中含纳米贵金属的粒子的粒径大小的表征参数，根据该表征参数与待测物浓度之间的关系，获知样本中待测物的浓度；

方法二，包括下列步骤：

采用均相竞争免疫分析法，将含有待测物的样本与被纳米贵金属标记的抗体和被纳米贵金属标记的抗原或半抗原在均相的免疫反应体系中进行竞争免疫反应，通过散射相关光谱技术获得表征反应液中含纳米贵金属的粒子的粒径大小的表征参数，根据该表征参数与待测物浓度之间的关系，获知样本中待测物的浓度。

2.如权利要求1所述均相免疫分析方法，其特征在于，所述待测物选自抗体或抗原，所述均相免疫反应体系为液相反应体系。

3.如权利要求1所述均相免疫分析方法，其特征在于，所述纳米贵金属选自纳米金、纳米银和纳米铂。

4.如权利要求1所述均相免疫分析方法，其特征在于，纳米贵金属标记抗体或抗原的摩尔比为1:1到1:50。

5.如权利要求1所述均相免疫分析方法，其特征在于，所述纳米贵金属标记抗原或抗体是将抗原或抗体经二硫键-琥珀酰胺酯-聚乙二醇修饰后与纳米贵金属共价连接而得。

6.如权利要求1-5任一权利要求所述均相免疫分析方法，其特征在于，所述通过散射相关光谱技术获得表征反应液中含纳米贵金属的粒子的粒径大小的表征参数的方法具体为：采用激光照射反应液，采集反应液受激光照射后产生的散射光，获得散射相关光谱曲线，从而获得表征反应液中含纳米贵金属的粒子的粒径大小的表征参数。

7.如权利要求6所述均相免疫分析方法，其特征在于，所述表征参数为反应液中粒子的特征扩散时间。

8.如权利要求6所述均相免疫分析方法，其特征在于，照射至反应液上的激光能量为100纳瓦到1毫瓦。

9.如权利要求6-8任一所述均相免疫分析方法，其特征在于，激光照射反应液的方法为：激发光源发射激光，经连续可调中性衰减片后，由扩束镜对激光进行扩束，激光扩束后经二色镜以45度反射进入高数值孔径物镜，聚焦在盖玻片上或微反应孔中的反应液中；所述采集散射光，获得散射相关光谱曲线的方法为：用同一物镜收集反应液的散射光，经过聚光镜聚焦后，经针孔进入单光子检测器，由单光子检测器得到散射光信号经处理得到散射相关光谱曲线。

10.如权利要求1均相免疫分析方法，其特征在于，方法一中，所述均相的反应体系中，以最终反应液的总体积为基准计，纳米贵金属标记抗体的初始浓度为10皮摩尔/升至1纳摩尔/升；方法二中，所述均相的反应体系中，以最终反应液的总体积为基准计，纳米贵金属标记抗体及纳米贵金属标记抗原的初始浓度均为10皮摩尔/升至1纳摩尔/升。