[发明专利]抗生素Tetrathiazomycin A及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

技术领域：

本发明属于工业微生物领域，具体涉及新的抗生素TetrathiazomycinA及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。 

背景技术：

恶性肿瘤是目前严重危害人类生命和生活质量的主要疾病之一，现已成为我国居民的主要死因，占死亡原因20%以上。20世纪下半叶以来，世界恶性肿瘤与死亡均呈上升趋势，尤其是70年代以后，恶性肿瘤以年均3%~5%的速度递增。世界卫生组织预测，到2020年，将有2000万新发恶性肿瘤病例，其中死亡人数达1200万，且绝大部分将发生在发展中国家。在恶性肿瘤的三大疗法中，药物治疗占用重要的地位。在合成化学类药物中多数都是以天然抗肿瘤活性成分为先导化合物的。据报道，1984年到1995年，天然产物占上市抗肿瘤药物的60%以上，1995-1999年，3个天然产物衍生物作为新的抗肿瘤药物上市，由此可见，天然产物是结构新颖和作用独特的抗肿瘤药物的重要来源。目前发现的多肽类化合物具有广泛的生物学活性，据报道，含有噻唑环和恶唑环的环肽具有很强的细胞毒活性，例如Urukthapelstatin A对人体肺癌细胞的IC₅₀值惊人的达到了12nM。 

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一个新的具有抗肿瘤活性的含四噻唑的内酰胺化合物Tetrathiazomycin A或其盐。 

本发明的含四噻唑的内酰胺化合物Tetrathiazomycin A或其盐，其结构如式（Ⅰ）所示： 

本发明的第二个目的是提供化合物Tetrathiazomycin A的制备方法，其特征在于，所述的化合物Tetrathiazomycin A是从放线菌Marinactinospora thermotolerans SCSIO00652的发酵培养物中制备分离得到的。 

优选通过以下方法从放线菌Marinactinospora thermotolerans SCSIO00652的发酵培养物中制备分离得到Tetrathiazomycin A，具体步骤如下： 

a）制备放线菌Marinactinospora thermotolerans SCSIO00652的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵液和菌丝体分离开，发酵液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相经浓缩后得到浸膏A； 

b）浸膏A经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇作为洗脱剂，从体积比100：0~1：1进行梯度洗脱，收集氯仿/甲醇体积比92：8~1：1梯度洗脱下来的馏分Fr.5-8，再经硅胶柱层析，用乙酸乙酯/甲醇作为洗脱剂，从体积比94：6~8：2进行梯度洗脱，收集体积比9：1~8：2洗脱的组分Fr.5-8-1，再经ODS反相中压液相色谱，以体积分数从10%~100%的甲醇/水梯度洗脱，收集体积分数80~90%的甲醇/水梯度洗脱下来的馏分，最后经高效液相色谱纯化后得到Tetrathiazomycin A。 

所述的a）步骤的制备Marinactinospora thermotolerans SCSIO00652的发酵培养物是通过以下方法制备的：将活化的Marinactinospora thermotolerans SCSIO00652接入种子培养基 中，28°C，200rpm，培养4d制得种子液，将种子液按10%的接种量接到发酵培养基中，28°C，200rpm，振荡培养7d，而制得发酵培养物，所述的种子培养基和发酵培养基的配方都为每升培养基中含有：淀粉10g，(NH₄)₂SO₄2g，K₂HPO₄1g，MgSO₄·7H₂O1g，NaCl1g，蛋白胨1g，酵母提取粉05g，trace element solution0.1mL，粗海盐30g，余量为水，pH7.4。 

本发明的第三个目的是提供Marinactinospora thermotolerans SCSIO00652在制备化合物Tetrathiazomycin A中的应用。