[发明专利]检测转基因作物的微流体蛋白质芯片及其试剂盒

权利要求书

1.高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片，其特征是：包括基于μParaflo^TM微流体生物芯片合成的含六种核酸序列的核酸芯片以及6种抗体-寡核苷酸复合物探针，从而实现对转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1Ac）、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1c）、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1F）、转苏云金芽泡杆菌Bt杀虫晶体蛋白（Cry1Ab）、大豆胰蛋白酶（SBTI）和新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因（NPTⅡ）这6种转基因蛋白的同时检测。

2.根据权利要求1所述的高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片，其特征是：

所述六种核酸序列为：

A：3' CAC ACG CCT TTA CGA AGA CGA T 5'

B：3' CAG GTC AAA AGG GTC CTT AGG GA 5'

C：3' TAG TGT GTT TCC GTT GAA AAC A 5'

D：3' TAG TTG TCT GTA ATT AAC CCG CG 5'

E：3' AAA CCG TTA CCA TCT TGA GTG TGG C 5'

F：3' TTA ACG TGC CAT AGG TAG ACA T 5'  ；

所述6种抗体-寡核苷酸复合物探针中的核酸序列和相应的检测抗体为：

a：  5' GTG TGC GGA AAT GCT TCT GCT A 3'，抗Cry1Ac兔单抗；

b：5' GTC CAG TTT TCC CAG GAA TCC CT 3'，抗Cry1c兔多抗；

c：   5' ATC ACA CAA AGG CAA CTT TTG T 3'，抗Cry1Ab兔单抗；

d：5' ATC AAC AGA CAT TAA TTG GGC GC 3'，抗Cry1F兔多抗；

e：   5' TTT GGC AAT GGT AGA ACT CAC ACC G 3'，抗SBTI兔多抗；

f：   5' AAT TGC ACG GTA TCC ATC TGT A 3'，抗NPTⅡ兔单抗。

3.根据权利要求2所述的高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片，其特征是：

所述抗体-寡核苷酸复合物探针，其合成方法是按照SoluLink^TM交联试剂盒对相应抗体和寡核苷酸链进行交联。

4.根据权利要求3所述的高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片，其特征是：所述按照SoluLink^TM交联试剂盒对相应抗体和寡核苷酸链进行交联所得的复合物具备以下特征：1）核酸的3’端与抗体上赖氨酸的自由氨基端相连；2）平均每个抗体上连有2-4条寡核苷酸；3）抗体具有良好的活性。

5.一种转基因检测试剂盒，其特征是包括以下成分：

①、含6种探针的μParaflo^TM微流体DNA芯片；

②、6种抗体-寡核苷酸复合物探针；

③、6种检测抗体；

④、封闭缓冲液；

⑤、洗涤缓冲液；

⑥、反应缓冲液；

所述成分①②④⑤用来即时生成如权利要求1、2、3或4所述的高通量检测转基因蛋白的微流体蛋白质芯片。

6.根据权利要求5所述的转基因检测试剂盒，其特征是：

所述成分③的6种检测抗体为：生物素标记抗Cry1Ac兔多抗、生物素标记抗Cry1c兔单抗、抗Cry1Ab鼠抗、抗Cry1F鼠抗、抗SBTI鼠抗和抗NPTⅡ鼠抗。