[发明专利]鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法无效

专利信息
申请号: 201210234670.0 申请日: 2012-07-06
公开(公告)号: CN102716473A 公开(公告)日: 2012-10-10
发明(设计)人: 耿照玉;陈兴勇;何艳;姜润深;时丹 申请(专利权)人: 安徽农业大学
主分类号: A61K39/00 分类号: A61K39/00;A61P43/00;C12N15/70;C12R1/19
代理公司: 安徽汇朴律师事务所 34116 代理人: 丁瑞瑞
地址: 230000 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 鹅产蛋 融合 催乳素 蛋白 主动 免疫 调控 方法
【权利要求书】:

1.一种鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,步骤包括:

(1)通过RT-PCR,从鹅下丘脑和垂体组织总RNA抽提物中扩增出全长PRL靶序列,并插入EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点;

(2)再插入PMD19-T载体,与pET32a双酶切并连接,转化DH5α;

(3)使用IPTG诱导3小时,以分泌型表达;

(4)诱导表达后的菌珠经高压超声破碎,离后上清溶液过Ni-亲和层析柱,纯化产物透析后冻干浓缩,得到融合催乳素表达蛋白,经蛋白定量后,将浓缩蛋白分别稀释至1~4mg/ml;

(5)将融合催乳素表达蛋白与佛氏完全佐剂以1:0.8~1.2的质量比混合;

(6)将混合物对鹅颈部皮下多点注射,注射剂量为1.5~2.5ml。

2.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述步骤(3)中,调节诱导后所表达蛋白产物浓度在300~350mg/L。

3.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述步骤(5)中,融合催乳素表达蛋白与佛氏完全佐剂以1:1的质量比混合。

4.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述步骤(6)中,注射剂量为2ml。

5.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述鹅选取皖西白鹅。

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