[发明专利]鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法无效
申请号: | 201210234670.0 | 申请日: | 2012-07-06 |
公开(公告)号: | CN102716473A | 公开(公告)日: | 2012-10-10 |
发明(设计)人: | 耿照玉;陈兴勇;何艳;姜润深;时丹 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61P43/00;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人: | 丁瑞瑞 |
地址: | 230000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鹅产蛋 融合 催乳素 蛋白 主动 免疫 调控 方法 | ||
1.一种鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,步骤包括:
(1)通过RT-PCR,从鹅下丘脑和垂体组织总RNA抽提物中扩增出全长PRL靶序列,并插入EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点;
(2)再插入PMD19-T载体,与pET32a双酶切并连接,转化DH5α;
(3)使用IPTG诱导3小时,以分泌型表达;
(4)诱导表达后的菌珠经高压超声破碎,离后上清溶液过Ni-亲和层析柱,纯化产物透析后冻干浓缩,得到融合催乳素表达蛋白,经蛋白定量后,将浓缩蛋白分别稀释至1~4mg/ml;
(5)将融合催乳素表达蛋白与佛氏完全佐剂以1:0.8~1.2的质量比混合;
(6)将混合物对鹅颈部皮下多点注射,注射剂量为1.5~2.5ml。
2.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述步骤(3)中,调节诱导后所表达蛋白产物浓度在300~350mg/L。
3.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述步骤(5)中,融合催乳素表达蛋白与佛氏完全佐剂以1:1的质量比混合。
4.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述步骤(6)中,注射剂量为2ml。
5.根据权利要求1所述的鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,所述鹅选取皖西白鹅。
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