[发明专利]一种嗜热链球菌增菌培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种嗜热链球菌增菌培养基，其特征在于，包括葡萄糖0.8～1.2g，酵母膏0.5～1.0g，大豆蛋白胨0.5～1.0g，番茄汁8～12mL，低聚木糖0.2～0.4g，低聚异麦芽糖0.2～0.4g，大豆低聚糖0.2～0.4g，水88～92mL，KH₂PO₄0.1～0.2g和吐温800.01～0.05mL，pH值7.0～7.2。

2.如权利要求1所述的嗜热链球菌增菌培养基，其特征在于，所述的番茄汁是将番茄洗净后，热烫软化、去皮破碎，然后加水打浆，煮沸后冷却，过滤，得到番茄汁。

3.如权利要求1所述的嗜热链球菌增菌培养基，其特征在于，所述的大豆低聚糖是将脱脂大豆粉的乙醇提取液用酸沉淀去除蛋白，得到大豆低聚糖提取液，再经过脱色、脱盐处理后得到大豆低聚糖。

4.一种嗜热链球菌增菌培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）番茄汁的制备：

取新鲜番茄用清水洗净，经过热烫软化、去皮破碎，加水打浆，然后煮沸10～30min，冷却后过滤，得到番茄汁；

2）大豆低聚糖的提取：

大豆粉经石油醚脱脂后得到脱脂大豆粉，然后将脱脂大豆粉用体积分数60～80%乙醇，在90～100℃索式提取器中提取150～200min，分离得到提取液后用饱和醋酸铅溶液沉淀蛋白；

沉淀完全后，调pH值至中性，加入草酸除去过量的铅离子，过滤除去沉淀，滤液用NaOH调至中性，得到大豆低聚糖提取液；

在大豆低聚糖提取液中加入活性炭于45～60℃脱色20～40min，分离得到脱色液后再上样于离子交换树脂进行脱盐处理，洗脱后收集得到大豆低聚糖；

3）低聚糖浓溶液的制备：

将低聚木糖、大豆低聚糖和低聚异麦芽糖分别配制成质量分数为1～5%的溶液，过滤；

4）嗜热链球菌增菌培养基的制备：

将葡萄糖，酵母膏，大豆蛋白胨，KH₂PO₄，吐温80混合溶于水中，用NaOH溶液调pH至7.0～7.2，然后经118℃，15min灭菌，最后再加入过滤的番茄汁和低聚糖溶液；

上述各组份的配比为：葡萄糖0.8～1.2g，酵母膏0.5～1.0g，大豆蛋白胨0.5～1.0g，番茄汁8～12mL，低聚木糖0.2～0.4g，低聚异麦芽糖0.2～0.4g，大豆低聚糖0.2～0.4g，水88～92mL，KH₂PO₄0.1～0.2g和吐温800.01～0.05mL。

5.如权利要求4所述的嗜热链球菌增菌培养基的制备方法，其特征在于，所述的番茄汁的过滤为先经过双层纱布过滤，再经121℃、20min高温灭菌的0.2微米的膜过滤。

6.如权利要求4所述的嗜热链球菌增菌培养基的制备方法，其特征在于，所述的大豆低聚糖的提取为：

大豆粉经石油醚脱脂、除去石油醚后，得到脱脂大豆粉；

然后用体积分数60～80%乙醇，按脱脂大豆粉：乙醇=1g∶8～10mL的料液比，在90～100℃索式提取器中提取150～200min，重复提取两次，合并提取液后用pH为4～5的饱和醋酸铅溶液沉淀蛋白；

沉淀完全后，调pH值至中性，加入草酸除去过量的铅离子，过滤除去沉淀；滤液用0.5mol/LNaOH调至中性，得到大豆低聚糖提取液；

在大豆低聚糖提取液中加入固形物质量1.5～2%的活性炭于45℃脱色30min，脱色液再以35m³/(m³·h)的速度流过50～60℃的732型阳离子交换树脂和717型阴离子交换树脂进行脱盐处理，将脱盐后的提取液浓缩后干燥得到大豆低聚糖。

7.如权利要求4所述的嗜热链球菌增菌培养基的制备方法，其特征在于，所述的低聚木糖分子式为(C₅H₁₀O₅)_n，n为2～7，分子量为300～1051；低聚异麦芽糖分子式为(C₅H₁₀O₅)_n，n为2～10分子量为300～2000。