[发明专利]深静脉血栓易感性检测试剂盒（MTHFR等基因）无效
| 申请号： | 201210236256.3 | 申请日： | 2012-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN103540649A | 公开（公告）日： | 2014-01-29 |
| 发明（设计）人： | 石慧林 | 申请（专利权）人： | 解码(上海)生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201203 上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 静脉 血栓 感性 检测 试剂盒 mthfr 基因 | ||
1.一种筛查深静脉血栓高危人群的基因无创检测试剂盒，其特征在于：检测EPCR基因上A6936G、MTHFR基因上C677T (rs1801133)、ACE基因上I/D (rs4646994)的3个单核苷酸多态性位点基因型的特异性引物与DNA测序引物、Taq酶、dNTP混合液、反应缓冲液、SAP酶、ExoI酶、BigDye mix、EDTA溶液、70%乙醇溶液、100%乙醇溶液、HIDI溶液、ddH2O等。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的特异性引物对是指针对EPCR基因上A6936G、MTHFR基因上C677T (rs1801133)、ACE基因上I/D (rs4646994)的3个单核苷酸多态性位点，能特异性扩增出包含这3个SNPs位点的DNA片段的引物对。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的DNA测序引物是针对EPCR基因上A6936G、MTHFR基因上C677T (rs1801133)、ACE基因上I/D (rs4646994)的3个单核苷酸多态性位点而设计，能通过DNA测序技术特异性检测出上述3个SNPs位点基因型的DNA测序引物。
4.根据权利要求1所示的试剂盒，其特征在于，所含的3对特异性引物序列如下：
（1）EPCR（A6936G）正向引物：5'AGACAAATGGATGGACCTG3'
EPCR（A6936G）反向引物：5' CAGACTAATTCAGCAAAGC3'
（2）MTHFR（C677T）正向引物：5'AGGGAGGCTTCAACTACGC3'
MTHFR（C677T）反向引物：5' GCGGTTGAGGGTGTAGAAGT3'
（3）ACE (I/D) 正向引物：5'CTGGGCAACAGAGTGAGACC3'
ACE (I/D) 反向引物：5'ACCCAAGTGCCAGTGATGTT3'。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所含的3条DNA测序引物序列如下：
（1）EPCR（A6936G）测序引物：5'AGACAAATGGATGGACCTG3'
（2）MTHFR（C677T）测序引物：5'AGGGAGGCTTCAACTACGC3'
（3）ACE (I/D) 测序引物：5' CTGGGCAACAGAGTGAGACC3'。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于试剂盒的组分和含量包括：
（1）PCR反应体系：10×PCR反应缓冲液2.5ul，25mM dNTP混合液0.2ul，5U／ul Taq DNA聚合酶 0.125ul，20uM特异性引物对，每条引物各0.25ul，ddH2O 19.175ul；
（2）PCR产物纯化体系：1 U／ul SAP酶0.75ul，10 U／ul ExoI酶0.375ul，ddH2O 3.875ul；
（3）测序反应体系：25% BigDye mix1ul，3.2uM DNA测序引物1ul，125mM EDTA溶液1ul，100%乙醇溶液15ul，70%乙醇溶液30ul，HIDI溶液8ul，ddH2O 2ul。
7.本试剂盒供一人份检测应用，试剂盒的保存温度为-20℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于解码(上海)生物医药科技有限公司，未经解码(上海)生物医药科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210236256.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
