[发明专利]一种芍药胚培养方法

权利要求书

1.一种芍药胚培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）胚的启动培养：获得经灭菌消毒的芍药胚，接种到以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤的浓度为0.2-0.5mg/L、萘乙酸的浓度为0-0.05mg/L、赤霉素的浓度为0.1mg/L的培养基上，常规培养；

2）将步骤1）中获得的胚苗，先后进行丛生芽诱导培养、丛生芽增殖培养、壮苗生根培养，获得芍药组培苗。

2.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，步骤1）所述胚的启动培养，所用培养基为：以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤的浓度为0.2mg/L、萘乙酸的浓度为0.05mg/L、赤霉素的浓度为0.1mg/L的培养基上，或者以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤的浓度为0.5mg/L、萘乙酸的浓度为0mg/L、赤霉素的浓度为0.1mg/L的培养基。

3.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，步骤1）所述获得经灭菌消毒的芍药胚，具体方法为：将芍药种子剥除种皮后，用洗洁精清洗种子表面的污渍，用1-3%的NaClO浸泡20-30min，流水冲洗30-40min，用75%的酒精消毒30s，无菌水冲洗至少一次，再用0.1%的HgCl₂消毒10min，无菌水冲洗至少一次，去除胚乳，获得经灭菌消毒的芍药胚。

4.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，步骤2）所述丛生芽诱导培养，所用培养基为：以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤1.0mg/L、赤霉素0.5mg/L的培养基。

5.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，步骤2）所述丛生芽增殖培养，所用培养基为：以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤1.0mg/L、赤霉素0-1.0mg/L、激动素0-1.5mg/L的培养基。

6.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，步骤2）所述丛生芽增殖培养，所用培养基为：以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤的浓度为1.0mg/L、赤霉素的浓度为1.0mg/L的培养基。

7.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，步骤2）所述壮苗生根培养，所用培养基为：以Ca²⁺浓度加倍的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有吲哚乙酸2.0mg/L、活性炭质量百分含量0.2%的培养基。

8.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，所述胚的启动培养，培养时间为30天；所述丛生芽诱导培养，培养时间为30-40天；所述丛生芽增殖培养，培养时间为30-40天；所述壮苗生根培育，培养时间为30天。

9.如权利要求1所述一种芍药胚培养的方法，其特征在于，芍药胚取材时间为9月上旬。

10.权利要求1-7任一项所述的一种芍药胚培养的方法，在芍药繁育中的应用。