[发明专利]超临界二氧化碳除脂生产水解脑蛋白粉和脑磷脂的方法

权利要求书

1.超临界二氧化碳除脂生产水解脑蛋白粉和脑磷脂的方法，其特征由以下生产步骤组成：（1）干燥  将新鲜或冷冻的动物脑去除脑膜和血管，压碎，在45℃真空条件下干燥至含水分5%以下，得动物脑干燥品，保存于-5℃下备用；

（2）去脂类  把动物脑干燥品装入超临界二氧化碳萃取机的萃取釜中，萃取条件为：萃取釜压力18～42Mpa，温度35～62℃；分离釜Ⅰ压力10～25Mpa，温度30～48℃；分离釜Ⅱ压力4～15Mpa，温度40～55℃；夹带剂为60%～98%乙醇，用量为脑干燥品的5%～60%，萃取时间0.5～6小时；二氧化碳流量20～80立升/公斤/小时；分离柱填料：颗粒活性碳、硅胶、氧化铝，以吸附腥臭气味；萃取结束后，分离釜Ⅰ中膏状物含脑磷脂类和胆固醇，用于提取脑磷脂；分离釜Ⅱ中为三酸甘油脂类，去掉；萃取釜中残留物含有脑蛋白，用于酶解生产脑蛋白水解粉；在2小时内没用完者，应密封保存于-5℃下备用；

（3）酶解  将萃取釜中残留物置于水解罐中，加纯化水2～8倍, 加入动物蛋白专用水解酶0.3～0.8 %，在一定pH条件下，以40℃～80℃下搅拌酶解3小时，加入风味酶0.08～0.2 %，继续水解3小时；灭酶，加入活性炭脱色除臭，板框压滤除去固体杂质，0.45μm微孔滤膜精滤，得精滤液；

（4）大孔树脂柱吸附  精滤液通过大孔树脂柱分离出脑蛋白水解液，阴树脂和阳树脂脱盐；（5）真空薄膜浓缩过柱后的脑蛋白水解液，喷雾干燥得到脑蛋白水解粉；

（6）取分离釜Ⅰ中含脑磷脂类和胆固醇的膏状物，在真空中干燥，得含脑磷脂和胆固醇的稠膏；

（7）提取脑磷脂  取稠膏加丙酮，用量为稠膏体积3.0～10倍，分三次萃取出胆固醇和油脂类，萃取液与母液分别回收丙酮，丙酮可重复使用；胆固醇和油脂类丢弃；在玻璃柱中装入100份层析用硅胶，另取5.0～10份硅胶与回收丙酮后等量含脑磷脂的母液相混合，将混合物加于硅胶柱上部，接着用含量95%热乙醇，流速3份/分钟，洗脱；收集脑磷脂乙醇液，真空回收乙醇得脑磷脂，含量≥90%，加氮气密闭保存。

2.根据权利1所述要求，步骤（1）所述的干燥，其特征是 ：干燥温度20℃～60℃，最优45℃，干燥后水分含量在2～10%，最优3%，干燥品保存于-5℃下备用。

3.根据权利1所述要求，步骤（2）所述的去脂，其特征是：  萃取釜压力20～45Mpa，最优为32.5 Mpa；温度35～62℃，最优41℃；分离釜Ⅰ压力10～25Mpa，最优为18 Mpa；温度30～60℃，最优为45℃；分离釜Ⅱ压力4～15Mpa，最优6Mpa，温度35～65℃，最优48℃；夹带剂为60%～98%的乙醇，最优95%，用量为脑干燥品的5%～60%，最优25%；萃取时间0.5～6小时，最优2小时；二氧化碳流量20～80立升/公斤/小时，最优60立升/公斤/小时。

4.根据权利1所述要求，步骤（3）所述的酶解 ， 其特征是：萃取釜中残留物加纯化水2～8倍，最优3倍；所加入的酶为：动物蛋白水解专用酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、酸性碱性混合蛋白酶、木瓜蛋白酶；残留物的质量与酶的质量比为100：0.3～0.8，最优0.5，在自然pH条件下，最优为pH7.5；以40℃～80℃，最优65℃下搅拌酶解3小时；加入风味酶，残留物的质量与风味酶的质量比100：0.08～0.2，最优0.16，在上述pH值和温度条件下继续水解3小时；升温到80℃～100℃，最优90℃，灭酶20分钟；降温到30℃～60℃，最优40℃，加入残留物1～6 %活性炭，最优3 %，搅拌15～50分钟，最优20分钟，再静置吸附30～60分钟，最优 30分钟；板框压滤除去固体杂质，压力为0.1～0.5Mpa，最优0.15Mpa，反复循环直至滤液澄清，经0.45μm微孔滤膜精滤，得酶解精滤液。