[发明专利]超临界二氧化碳除脂生产水解脑蛋白粉和脑磷脂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种应用超临界二氧化碳萃取去除动物脑组织中脂类，复合酶水解萃取釜中残留脑蛋白为氨基酸和肽，浓缩、干燥得脑蛋白水解粉；分离釜Ⅰ中萃取物经丙酮溶解除去胆固醇，硅胶层析提取脑磷脂。其方法属于食品工业领域。

背景技术

长期以来人们用动物脑蛋白水解物治疗，协助治疗老年痴呆症、脑卒中、脑外伤、脑血栓引起的并发症；婴幼儿脑发育不良；白领工作者用脑过度引起的头晕都收到良好效果。这是因为动物脑组织的构成物质与人类脑组织相近.。经水解成分子量小的肽，氨基酸后可轻易透过血脑屏障，进入人类大脑参与脑组织的合成，参与大脑神经传递物质的合成和神经系统传递活动。但采用注射方法给药，特别严重的是与中草药配制的注射液易产生过敏和毒性反应，这方面有许多报导（罗晓珊等  脑蛋白水解物注射液严重不良反应典型病例分析  临床合理用药杂志 2011,4(10)，159-160）。在专利中没有查找到应用超临界二氧化碳去除脂类后再水解残留下的蛋白质生产氨基酸、肽的专利权。有专利将脑组织匀浆干燥成粉沫直接使用（CN 00119197．2）；有的经过水解，但没有除去脂类物质（CN 201110148556．1）。脑组织中脂肪含量8．9%左右，胆固醇3．1% 。中国成人每天胆固醇摄取限量为106～254㎎，不除去脂肪、胆固醇对于高血脂、高胆固醇的人群是有害的，只要每天吃进3～8g脑组织或其制成品，都不利于高血脂、高胆固醇的人群。在生产工艺上脂类存在大大地加大了提取液过滤的难度，于是不得不加水浠释，加温使溶液比较易于过滤些，由于水分增加，溶液含量只有1.2%，后处理浓缩、干燥的成本也增加（CN 200910072481.6）。有的方法采用丙酮、乙酸乙脂等有机溶剂萃取出脂类(CN 201110050728.1)。但脑蛋白在有机溶剂作用下产生变性结块，变性蛋白质对酶敏感性降低，导致水解不完全。水解物收获少，分子量大，在8000~20000Da之间（CN201110227333．4）。分子量一般在5肽（650Da）以下才安全；

      采用口服方法可以避免过敏反应和减少毒性。近些年来采用口服方法，水解脑蛋白的使用范围、使用量逐步提高。但不除去脑组织中脂类，或者采用丙酮等有机溶剂除去脂类并非理想，大量胆固醇、三酸甘油对人体确实不利。我们采用超临界二氧化碳萃取去除脑组织中脂类，效果显著。超临界二氧化碳溶解能力相当于正己烷，能溶解组织中脂类。(胡卫军等  超临界二氧化碳萃取去除蛋黄粉中胆固醇和甘油三脂的研究《生命科学研究》 2001年第5卷第2期186-188)。当压力解除，液态二氧化碳变为气态溶解力降低，被溶解的物质又析出。没有有机溶剂残留，空气中也不会有污染。经我们试验显示：能有效除去脑组织中脂类，残渣经酶解得氨基酸和肽的混合物。脂类再经丙酮除去胆固醇、三甘脂，硅胶层析分离得有用的脑磷脂。（CN 03140389.1，用超临界二氧化碳萃取卵磷脂的方法)。

   在中国专利查询网上尚未查找到用超临界二氧化碳萃取去除脑组织中脂类的专利；更没有用超临界二氧化碳萃取去除脑组织中脂类，再酶解提取水解脑蛋白粉的专利，也没有过同时提取脑组织中水解脑蛋白粉和脑磷脂二种物质的专利。

发明内容

本发明的目的在于用超临界二氧化碳萃取去除脑组织中脂类，再酶解生产水解脑蛋白粉；另一个目的是用萃取出的膏状物生产脑磷脂的工业化生产方法，

其发明内容简介如下：

（1）干燥  将新鲜或冷冻的动物脑去除脑膜和血管，压碎，在45℃真空条件下干燥至含水分5%以下，得动物脑干燥品，保存于-5℃下备用；

（2）去脂类  把动物脑干燥品装入超临界二氧化碳萃取机的萃取釜中，萃取条件为：萃取釜压力18～42Mpa，温度35～62℃；分离釜Ⅰ压力10～25Mpa，温度30～48℃；分离釜Ⅱ压力4～15Mpa，温度40～55℃；夹带剂为60%～98%乙醇，用量为脑干燥品的5%～60%，萃取时间0.5～6小时；二氧化碳流量20～80立升/公斤/小时；分离柱填料：颗粒活性碳、硅胶、氧化铝，以吸附腥臭气味；萃取结束后，分离釜Ⅰ中膏状物含脑磷脂类和胆固醇，用于提取脑磷脂；分离釜Ⅱ中为三酸甘油脂类，去掉；萃取釜中残留物含有脑蛋白，用于酶解生产脑蛋白水解粉；在2小时内没用完者，应密封保存于-5℃下备用；