[发明专利]一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法

权利要求书

1.一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）样品准备：将10mg动物组织剪碎后得样品，将样品置于螺口玻璃瓶中；

2）提取、皂化及甲酯化：将质量分数为37%的浓盐酸与2,2-二甲氧基丙烷按照0.02︰0.98的体积比混合得浓盐酸2,2-二甲氧基丙烷溶液，向螺口玻璃瓶内的样品中分别加入20μL质量浓度为1mg/mL的内标物石油醚溶液，以及1mL浓盐酸2,2-二甲氧基丙烷溶液，然后充氮气保护下震荡20min，震荡后用氮气将螺口玻璃瓶内的液体吹干，吹干后向螺口玻璃瓶内加入2.5mL质量分数为13%的三氟化硼甲醇溶液，然后将螺口玻璃瓶于80-85℃水浴中加热1小时；

3）加热结束后向螺口玻璃瓶内加入2.5mL去离子水，然后用石油醚萃取2次，取石油醚层，将石油醚层用无水Na₂SO₄干燥，干燥后过滤得滤液，将滤液减压浓缩至体积不再减少得检测样，向检测样充入氮气进行保护；

4）采用气相色谱-质谱联用仪对检测样内的脂肪酸进行测定；

5）数据分析及样品鉴定：经过步骤4）后，根据获得的原始光谱数据及质谱数据，计算检测样内各脂肪酸组分的相对含量以及绝对含量。

2.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述动物组织包括大脑、肝脏、肾脏、心脏、血液或肌肉组织。

3.根据权利要求2所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述动物组织的来源包括小鼠、大鼠、比格犬、恒河猴、猪、牛、鸡、鸭、鱼或人。

4.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述气相色谱的工作条件为：检测样溶于500μL正己烷后上样，进样量为1μL，进样方式为不分流，载气为流速1.5mL/min的氦气，升温程序为：初始温度为60℃，保持4min，然后以5℃/min升至150℃，然后以4℃/min升至300℃，保持5min。

5.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述质谱的工作条件为：采用EI源、正离子检测，电子能量为70eV，离子源温度为230℃，单四级杆温度为150℃，扫描方式为全扫描方式，电子倍增器电压为1070V，溶剂延迟为3.75min。

6.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述相对含量采用面积归一化方法进行计算。

7.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述绝对含量的计算方法为：脂肪酸组分对应的峰面积与内标物峰面积的比值乘以内标物的浓度。

8.根据权利要求7所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法，其特征在于：所述内标物包括十五烷酸、十七烷酸、十九烷酸、二十一烷酸或二十三烷酸。