[发明专利]检测T-2毒素的酶联免疫试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种检测T-2毒素的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于包括有：

（1）包被有T-2毒素偶联抗原的酶标板；

（2）T-2毒素标准品溶液；

（3）浓缩酶结合物；

（4）酶结合物稀释液；

（5）底物显色液；

（6）终止液。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述T-2毒素偶联抗原是由T-2毒素半抗原与载体蛋白偶联得到，所述T-2毒素半抗原结构如下：

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于所述T-2毒素半抗原的制备方法主要包括如下步骤：

24mg T-2毒素、30mg邻苯二甲酸酐和0.1ml吡啶在2ml DMSO中的混合液，在80℃下搅拌反应15小时，蒸除溶剂，柱层析纯化得到邻苯二甲酸单T-2毒素酯。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的浓缩酶结合物为酶标记的T-2毒素单克隆抗体。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述浓缩酶结合物的标记酶为辣根过氧化物酶；酶结合物是采用过碘酸钠法将标记酶与抗体偶联得到。

6.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的终止液为1~2mol/L的硫酸或盐酸溶液，所述底物显色液由底物液A液和底物液B液组成，底物液A液为过氧化脲溶液，底物液B液为四甲基联苯胺溶液。

7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所用包被缓冲液为pH9.0~9.6，0.2mol/L碳酸盐缓冲液，所用封闭液为pH7.2~7.4，0.1mol/L磷酸盐缓冲液，所述百分比为重量百分比。

8.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的酶结合物稀释液为pH7.2~7.4，含0.05%~0.1%牛血清白蛋白，0.1mol/L的磷酸盐缓冲液，所述百分比为重量百分比。

9.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述T-2毒素标准品溶液浓度分别为0μg/L、1μg/L、3μg/L、9μg/L、27μg/L、81μg/L。

10.一种检测样品中T-2毒素含量的方法，主要步骤包括：

1）将待测样品进行前处理；

2）用权利要求1-9任一项所述的酶联免疫试剂盒进行检测；

3）分析检测结果。