[发明专利]甜瓜抗蔓枯病聚合基因的鉴定无效
申请号: | 201210254561.5 | 申请日: | 2012-07-23 |
公开(公告)号: | CN102845300A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 陈劲枫;徐兵划;钱春桃;娄群峰;王红英 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | A01H1/04 | 分类号: | A01H1/04;A01H1/02;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210095 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甜瓜 抗蔓枯病 聚合 基因 鉴定 | ||
1.甜瓜抗蔓枯病聚合基因材料创制方法:
通过抗蔓枯病材料PI 420145作为母本与父本抗蔓枯病材料PI482398(Gsb-4)进行杂交,自交,室内PCR鉴定,田间抗性筛选和农艺性状选择,连续自交三代得到F4,在F4中筛选出PI 420145和PI482398抗蔓枯病基因聚合的纯合株系。
2.PI 420145、PI482398抗蔓枯病基因分子标记定位:
已筛选出3个AFLP分子标记EcoRI-TG/MseI-CTC200,EcoRI-AT/MseI-CTG90,EcoRI-TC/MseI-CAG60与PI420145的抗蔓枯病基因连锁;筛选到一个SSR标记与PI482398的抗蔓枯病基因连锁,该标记为CMAT170a,用该SSR标记能扩增出长度约为120bp的DNA片段。
3.甜瓜PI 420145×PI482398 F4抗蔓枯病基因聚合,其特征在于:
PI420145、PI482398蔓枯病抗基因均为单显性。PI420145×PI482398的自交后代F4聚合了PI420145和PI482398抗蔓枯病基因,三个AFLP标记EcoRI-TG/MseI-CTC200,EcoRI-AT/MseI-CTG90,EcoRI-TC/MseI-CAG60,在F4和PI420145上分别扩增出相同大小的特异片段。SSR标记CMAT170a在F4和PI482398上均扩增出长度大小约为120bp的特异片段。回收AFLP和SSR特异条带,克隆测序,F4上扩增出的特异片段与在PI 420145、PI482398上扩增出的特异片段大小、序列均相同。
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