[发明专利]一种快速的硫酸依替米星中控检测方法

权利要求书

1.一种依替米星的检测方法，其特征在于，该方法采用超高效液相色谱法，同时使用蒸发光散射检测器实现快速检测。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所使用的液相色谱仪耐受压力不低于600bar，仪器型号包括但不限于Waters H-Class或Agilent 1260或Agilnet 1290。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，选用十八烷基硅烷键合硅胶填料色谱柱，粒径1.7~3.5μm，柱规格为50mm～150mm×1.0~4.6mm，柱孔径为80-120A°。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，流动相分为有机相和水相，有机相为甲醇或乙腈，水相为水-氨水-冰醋酸混合溶液体积比范围为（88~98）:（1~5）：（0.1~1）。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，有机相与水相的体积比按时间顺序从20:80变化到90:10。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，流动相流速为0.5~2ml/min，进样量为1μl~10μl。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，选用蒸发光散射检测器，参数为漂移管温度为45~70℃，氮气流速1.5~3.0L/min，Gain值1~7。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤如下：

步骤1，配制供试品溶液：含乙醇的依替米星中间产品解吸液的制备，方法如下：取原料车间不同时间段收集的中间产品依替米星解吸液，以0.22μm滤膜过滤，即得；

步骤2，对照品溶液：精密称取依替米星对照品适量，用水配制成每ml含依替米星0.5mg，并逐步稀释，其中每ml含依替米星0.03mg作为对照溶液1，每ml含依替米星0.05mg作为对照溶液2，每ml含依替米星0.10mg作为对照溶液3，每ml含依替米星0.20mg作为对照溶液4，每ml含依替米星0.40mg作为对照溶液5，每ml含依替米星0.50mg作为对照溶液6；

步骤3，注入色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中依替米星的含量。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，色谱条件如下：

色谱柱：填料为十八烷基硅烷键合硅胶，粒径1.7~3.5μm，柱规格为50mm～150mm×1.0~4.6mm，柱孔径为80-120A°，流动相：分为有机相和水相，有机相为甲醇或乙腈，水相为水-氨水-冰醋酸混合溶液体积比范围为（88~98）:（1~5）：（0.1~1），有机相与水相的体积比按时间顺序从20:80变化到90:10，流速为0.5~2ml/min，进样量为1μl～10μl，检测器为蒸发光散射检测器，参数为漂移管温度为45~70℃，氮气流速1.5~3.0L/min，Gain值1~7。

10.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，色谱条件如下：

色谱仪：Agilent 1260 infinity series；色谱柱：Phenomenex Synergi Fusion-RP(50×4.6mm，2.5μm)；流动相A：甲醇，流动相B：水-氨水-冰醋酸（96:3.6:0.4），按如下表中进行梯度洗脱。

时间（min）B相比例（%）0 251 304 306 608 609 9010 9011 25

流速：0.8ml/min；进样量5μl；蒸发光散射检测器漂移管温度为45℃，氮气流速1.5L/min，Gain值5。