[发明专利]一种制备浆细胞的方法及其得到的浆细胞有效
| 申请号： | 201210262858.6 | 申请日： | 2012-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN102807994A | 公开（公告）日： | 2012-12-05 |
| 发明（设计）人： | 江小霞;毛宁 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100850 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 浆细胞 方法 及其 得到 | ||
1.一种用B细胞制备浆细胞的方法，依次包括如下步骤：
（1）干扰离体的B细胞中MYSM1基因的表达；所述MYSM1基因为编码序列表的序列1所示蛋白质的基因；
（2）采用脂多糖诱导细胞分化为浆细胞。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述“干扰B细胞中MYSM1基因的表达”的实现方式如下：在所述离体的B细胞中导入抑制所述MYSM1基因表达的物质。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述“抑制所述MYSM1基因表达的物质”为表达针对所述MYSM1基因的shRNA的重组慢病毒。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述“在所述离体的B细胞中导入抑制所述MYSM1基因表达的物质”的实现方式如下：将所述重组慢病毒与所述离体的B细胞共培养。
5.如权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述重组慢病毒的制备方法包括如下步骤：将重组质粒甲、质粒pMDLg/pRRE、质粒pRSV-Rev和质粒pMD2.G共转染哺乳动物细胞，培养细胞后得到重组慢病毒；所述重组质粒甲为含有DNA片段甲的质粒；所述DNA片段甲编码的RNA为具有沉默所述MYSM1基因的功能的shRNA。
6.如权利要求3或4或5所述的方法，其特征在于：所述重组慢病毒的感染剂量为MOI=5。
7.如权利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：进行所述共培养时，加入辅助病毒感染的试剂。
8.如权利要求1至7中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，所述诱导细胞分化的时间为2-4天。
9.如权利要求1至8中任一所述的方法，其特征在于：所述离体的B细胞为离体的小鼠B细胞。
10.权利要求1至9中任一所述方法制备得到的浆细胞。
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