[发明专利]一种利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法有效
申请号: | 201210268701.4 | 申请日: | 2012-07-30 |
公开(公告)号: | CN102759519A | 公开(公告)日: | 2012-10-31 |
发明(设计)人: | 贾东芬;王亚军 | 申请(专利权)人: | 六角体科技(天津)有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300475 天津市滨海新区开发区*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 荧光 强度 检测 硝基 呋喃 代谢物 方法 | ||
1.一种利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述方法包括:
A 通过提取剂提取样品,并将提取的样品通过上清液进行液化;
B 将液化后的样液进行衍生化,得到衍生化样液;
C 将衍生化样液通过萃取柱进行萃取及洗脱剂的洗脱,得到洗脱液;
D 通过萃取剂对洗脱液进行萃取,得到萃取后的萃取液;
E 吸取下层萃取液于点滴板一孔上,在该孔上加入定性试剂并混合均匀,形成待测样品混合液;
F 吸取对照液或阴性样液于点滴板对照孔上;
G 将点滴板置入硝代速测仪中,通过待测样品混合液的荧光强度与对照液或阴性样液的荧光强度判断所述待测样品中含有的硝基呋喃类代谢物的含量。
2.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述步骤A具体包括:将获取的样品与提取剂混合超声提取,并振摇过滤或离心后,取上清液于离心管中。
3.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于2种提取剂:提取剂1为固体提取剂其配比为酸性氧化铝、硅胶C18键合材料和吸附型离子交换树脂按30:40:30比例混和物;
提取剂2为:三氯乙酸-甲醇溶液;
洗脱剂为:5%冰乙酸-甲醇溶液。
4.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,步骤B具体包括:所述液化后的样液通过衍生化试剂进行超声衍生化并振摇,取出冷却至室温。
5.根据权利要求1或4所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述衍生化试剂包括4种:衍生化试剂1为2%柠檬酸钠水溶液、衍生化试剂2为5%磷酸二氢氨水溶液、衍生化试剂3为1.0%邻氯水杨醛甲醇溶液、衍生化试剂4为1.0%三氯化铽。
6.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述步骤C中,萃取衍生化样液的萃取柱中衍生化样液的萃取柱中设置有乙酸乙酯、激活剂为:50%甲醇水溶液。
7.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述步骤D具体包括向收集的洗脱液中加入萃取剂振摇并离心处理,弃去下层液体和上层液体。
8.根据权利要求1或7所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述萃取剂包括3种:萃取剂1为饱和食盐水、萃取剂2为一甲醇水溶液、萃取剂3为苯。
9.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述定性剂为:0.01%氯化铽水溶液。
10.根据权利要求1所述的利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法,其特征在于,所述硝基呋喃代谢物包括呋喃唑酮代谢物、呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物及呋喃妥因代谢物。
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