[发明专利]一种利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品安全检测领域，尤其涉及一种利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法。

背景技术

目前，国内外已建立的检测方法主要采用了液相色谱-质谱联用法（GB/T 21311-2007）和酶联免疫法。以上两种均存在前处理时间长，提取操作繁琐、费时等缺点。在检测方面，酶联免疫法主要用于快速筛选，但检测方法单一，只能分别检测一次待测物，检测设备虽比较便宜，但检测试剂昂贵。

《中华人民共和国国家标准农业部1077号公告-2-2008》“水产品中硝基呋喃类代谢物残留量-高效液相色谱法” 采用了新型衍生剂与SPE柱提取净化技术，与现有的国标相比，衍生化时间由不少于16小时缩短到1个小时，提取净化由2小时缩短到0.5小时,整体检测时间由20小时缩短为2小时。新的方法突出了新的机理，前处理过程简化掉原有标准中难控制的衍生化酸度调节和繁琐的提取净化操作。方法准确、可靠，灵敏度高，且大幅度降低检测成本（时间、仪器、试剂），总体技术达到了国际先进水平。该标准已在08年8月在水产行业成功推广使用，对硝基呋喃代谢物的控制起到了积极的推进作用。

对于全国范围的大规模监控检测来说，使用上述几种方法是可行的。但其中仍然存在不足。(1)目前各地的检测条件还不完全统一，具有液相色谱-串联质谱仪、液相色谱仪的实验室很少，原因是这些仪器都很昂贵，需要进行大量的投资才可行；（2）样品处理和检测周期过长，不能对源头及时监控，无法满足大量的硝基呋喃代谢物普查工作的需求。因此，行业内急需一种无需大型精密仪器、价格低廉，并且能够快速便捷的现场检测方法，来弥补此领域的技术空白。

发明内容

为解决上述中存在的问题与缺陷，本发明提供了一种利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法。所述技术方案如下：

一种利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法，包括： 

A 通过提取剂提取样品，并将提取的样品通过上清液进行液化；

B 将液化后的样液进行衍生化，得到衍生化样液；

C 将衍生化样液通过萃取柱进行萃取及洗脱剂的洗脱，得到洗脱液；

D 通过萃取剂对洗脱液进行萃取，得到萃取后的萃取液；

E 吸取下层萃取液于点滴板一孔上，在该孔上加入定性试剂并混合均匀，形成待测样品混合液；

F 吸取对照液或阴性样液于点滴板对照孔上；

G 将点滴板置入硝代速测仪中，通过待测样品混合液的荧光强度与对照液或阴性样液的荧光强度判断所述待测样品中含有的硝基呋喃类代谢物的含量。

本发明提供的技术方案的有益效果是：

具有操作简便、成本低廉、可现场判定结果的特点。可满足农业、质检、工商、卫生、检验检疫等食品安全监管部门的现场监督检查需要，对畜禽及水产品养殖、生产与经营企业控制产品质量也有重要意义。

附图说明

图1是利用荧光强度检测硝基呋喃代谢物的方法流程图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述：

本实施例提供了一种用荧光强度检测硝基呋喃代谢物方法，所述方法包括：

步骤10 通过提取剂提取样品，并将提取的样品通过上清液进行液化；

步骤20 将液化后的样液进行衍生化，得到衍生化样液；

步骤30 将衍生化样液通过萃取柱进行萃取及洗脱剂的洗脱，得到洗脱液；

步骤40 通过萃取剂对洗脱液进行萃取，得到萃取后的萃取液；

步骤50 吸取下层萃取液于点滴板一孔上，在该孔上加入定性试剂并混合均匀，形成待测样品混合液；

步骤60 吸取对照液或阴性样液于点滴板对照孔上；

步骤70 将点滴板置入硝代速测仪中，通过待测样品混合液的荧光强度与对照液或阴性样液的荧光强度判断所述待测样品中含有的硝基呋喃类代谢物的含量。

其上述方法具体检测步骤如下：

提取：称取已绞碎或匀质的样品10g与50mL的离心管中，倒入一瓶固体提取剂和一瓶液体提取剂，振摇1分钟使样品完全分散开与提取剂充分接触后，在37～40℃条件下超声提取15分钟取出，振摇约1分钟后，过滤或离心，取上清液10mL于另一支50mL的离心管中。

上述过滤过程为：取一块脱脂棉，塞住漏斗上颈口，加3mL净化剂润洗脱脂棉，用一次性吸管吸取10mL样液过滤并收集。

上述离心是在5000r/min离心5分钟后，取上清液10mL。