[发明专利]一种利用SILAC整体标记果蝇蛋白质组的方法及专用培养基有效
申请号: | 201210270052.1 | 申请日: | 2012-07-31 |
公开(公告)号: | CN102805052A | 公开(公告)日: | 2012-12-05 |
发明(设计)人: | 徐平;杨大福;常蕾 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
主分类号: | A01K67/033 | 分类号: | A01K67/033;A23K1/18 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 silac 整体 标记 果蝇 蛋白质 方法 专用 培养基 | ||
1.一种SILAC标记果蝇专用培养基,按照如下方法制备:将SILAC标记的酵母菌体涂布在果蝇培养基上,得到SILAC标记果蝇专用培养基。
2.根据权利要求1所述的专用培养基,其特征在于:
所述果蝇培养基由低熔点琼脂糖、葡萄糖、对羟基苯甲酸甲酯、乙酸乙酯和水组成;所述低熔点琼脂糖、所述葡萄糖、所述对羟基苯甲酸甲酯、所述乙酸乙酯的质量比为0.8:10:0.002:0.8。
3.根据权利要求2所述的专用培养基,其特征在于:;
所述果蝇培养基中,所述低熔点琼脂糖在所述果蝇培养基中的浓度为0.8%(质量百分含量);所述葡萄糖在所述果蝇培养基中的浓度为10%(质量百分含量);所述对羟基苯甲酸甲酯在所述果蝇培养基中的浓度为0.002%(质量百分含量);所述乙酸乙酯所述琼脂在所述果蝇培养基中的浓度为0.8%(质量百分含量)。
4.根据权利要求1-3中任一所述的专用培养基,其特征在于:
所述SILAC标记的酵母菌体按照如下方法制备:将赖氨酸营养缺陷型酵母菌株在含有重稳定性同位素标记赖氨酸的SILAC标记酵母专用培养基中培养,收集菌体,得到SILAC标记的酵母菌体。
5.根据权利要求4所述的专用培养基,其特征在于:
所述重稳定性同位素标记赖氨酸为L-lysine-13C6;所述培养的方式为30℃培养9代,共培养18h。
6.权利要求1-5中任一所述的专用培养基在SILAC标记果蝇蛋白质组中的应用。
7.一种SILAC标记果蝇蛋白质组的方法,包括如下步骤:在权利要求1-5中任一所述的专用培养基上培养果蝇的卵至发育成成虫,得到SILAC整体标记果蝇蛋白质组的果蝇,实现SILAC整体标记果蝇蛋白质组。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述果蝇的卵为将成对的雌雄果蝇在权利要求1-5中任一所述的专用培养基上培养、产卵得到。
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