[发明专利]与番茄黄化卷叶病毒病抗性基因Ty-2紧密连锁的分子标记有效
| 申请号： | 201210270653.2 | 申请日： | 2012-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN102766626A | 公开（公告）日： | 2012-11-07 |
| 发明（设计）人： | 杜永臣;国艳梅;杨晓慧;王孝宣;高建昌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/63;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;张庆敏 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 番茄 黄化 病毒 抗性 基因 ty 紧密 连锁 分子 标记 | ||
1.一种与番茄黄化卷叶病毒Ty-2抗性基因紧密连锁的分子标记，该分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.扩增权利要求1所述分子标记的引物。
3.如权利要求2所述的引物，该引物序列如下：
P1：5’-CACACATATCCTCTATCCTATTAGCTG-3’；
P2：5’-CGGAGCTGAATTGTATAAACACG-3’。
4.一种含有权利要求1所述分子标记的载体。
5.使用权利要求1所述分子标记的检测方法，其特征在于，该方法以抗感番茄黄化卷叶病毒的番茄基因组DNA为模板经PCR扩增，得到能同时鉴定父本、母本及其杂合体的基因型的特异谱带，该特异谱带为携带抗性基因的植株谱带和不携带抗性基因的植株谱带，所述携带抗性基因的植株谱带为权利要求1所述的分子标记。
6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述不携带抗性基因的植株谱带的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR体系如下：10μL反应体系包括正、反向引物各0.4μM，0.8mM dNTPs，2.5mMMgCl2,1μl 10X buffer，0.25units Taq聚合酶，DNA模板15ng。
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序均为：94℃预变5min;94℃变性30s,55℃或60℃退火45s,72℃延伸30-60s,37个循环;72℃延伸5-10min;保存温度4℃。
9.权利要求1所述分子标记在番茄黄化卷叶病毒抗性基因定位、检测或标记辅助育种中的应用。
10.权利要求5-8任意一项所述检测方法在番茄黄化卷叶病毒抗性基因定位、检测或标记辅助育种中的应用。
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