[发明专利]以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体及其培育方法

权利要求书

1.一种以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步：将蛹虫草子实体在固体培养基上经孢子分离提纯复壮，得到蛹虫草菌丝体，培养温度为20℃，培养时间12天，淘汰绒毛多不转色的菌丝体，挑选转色好，转色快，贴着培养基长势快的菌丝体留种；

第二步：在20℃-22℃，120r/m的条件下，将第一步得到的留种菌丝体经用液体培养基振荡培养4-5天，并且有小菌球充满液体培养基，制成液体菌种；

第三步：用消毒剂对金蝉幼虫进行浸泡消毒10分钟，然后用无菌水洗三次，用紫外灯照2小时，最后在蝉幼虫身体上用无菌针扎小洞8个，前胸4个，后胸4个，用无菌注射器吸入第二步得到的液体菌种注入蝉幼虫体后背；

第四步：将第三步得到的已注射感染的蝉幼虫置于无菌的组培瓶内，用注射器将0.1ml液体菌种注入蝉幼虫外体，盖上瓶盖，黑暗保湿培养3天，温度为18℃-23℃，湿度为80-100％；然后在20℃下培养20天，光照为12h/d，光照强度为在150-250lx，打开瓶盖，注入2ml无菌水，继续培养30-40天，至蝉花子实体长至3cm及以上长，即收获。

2.根据权利要求1所述的一种以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体的培育方法，其特征在于，所述第一步中的固体培养基的成份为：以重量百分比计的蔗糖1.5％，马铃薯2％，KH₂PO₄0.25％，MgSO₄·7H₂O 0.15％，维生素B₁0.01％，琼脂1.6％和蛋白胨0.8％。

3.根据权利要求1所述的一种以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体的培育方法，其特征在于，所述第二步中的液体培养基的成份为：以重量百分比计的蔗糖3％，马铃薯2％，KH₂PO₄ 0.3％，MgSO₄·7H₂O 0.15％，维生素B₁ 0.01％，琼脂0.05％和蛋白胨1％。

4.根据权利要求1所述的一种以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体的培育方法，其特征在于，所述的第三步中多个小洞的具体数量为8个，分别为前胸4个，后胸或后背4个。