[发明专利]移植肾排斥反应预警试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种移植肾排斥反应预警试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测移植肾排斥反应的蛋白的抗体，所述抗体为IL-1Rα，sCD40L和IL-20。

2.根据权利要求1所述的移植肾排斥反应预警试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还含有：

（1）96孔滤膜板和两张封板膜；

（2）所述试剂盒中蛋白抗体的标准品；

（3）质控对照；

（4）血清基质；

（5）实验液；

（6）洗液；

（7）藻红蛋白-链霉亲合素标记抗体；

（8）珠子稀释液；

（9）权利要求1所述的检测移植肾排斥反应的蛋白的抗体；

（10）预包被抗体的珠子。

3.根据权利要求2所述的移植肾排斥反应预警试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中：

（1）所述96孔滤膜板和两张封板膜购自Millipore公司，货号MX-PLATE；

（2）所述标准品购自Millipore公司，货号MXH8060,MXH8062,MXH8063,LHSP-8063和HSCR-8032；

（3）所述质控对照购自Millipore公司，货号为：MXH6060,MXH6062,MXH6063,LHSP-6063和HSCR-6032；

（4）所述血清基质购自Millipore公司，货号为：MXHSM，LHSP-SM,HSCR-SM；

（5）所述实验液购自Millipore公司，货号L-AB；

（6）所述洗液购自Millipore公司，货号L-WB；

（7）所述藻红蛋白-链霉亲合素标记抗体购自Millipore公司，货号L-SAPE9，L-SAPE3,L-SAPE10,L-SAPE11,L-SAPE6；

（8）所述珠子稀释液购自Millipore公司，货号LBD；

（9）检测抗体购自Millipore公司，货号MXH1060，MXH1062，MXH1063，LHSP-1063,HSCR-1032；

（10）所述预包被抗体的珠子购自Millipore公司，货号MXHPMX39，MXHP2PMX23,HSP，HASP-PAI1，MXH3PMX9，HSCRPMX14。 

4.权利要求1所述试剂盒的使用方法，其特征在于：

（1）采集全血，室温静置，1000rpm离心5~15分钟收取上清，分装后冷冻保存备用；

（2）用实验液或洗涤液预湿实验板，置于振荡器振摇5~20分钟；吸走实验板孔中的液体，吸干实验板底；

（3）相应孔分别加入梯度稀释的标准品、质控对照和样品；

（4）在背景孔、标准品和质控对照孔中加入血清基质；

（5）每孔加入珠子；

（6）封板后将实验板振摇4℃孵育过夜或室温下孵育0.5~2h；吸走实验板孔中的液体，吸干实验板底；利用洗液洗涤实验板两次；

（7）每孔加入相应的检测抗体；室温下振摇实验板0.5~2h；

（8）每孔加入藻红蛋白-链霉亲合素标记抗体；室温下振摇实验板孵育20~40min；用洗液洗涤洗扳两次；

（9）每孔加入鞘液，检测分析得到实验结果。