[发明专利]一种抗菌剂及其制备方法

权利要求书

1. 一种含有ctl基因、Pie1启动子的中间载体pFastBac-Pie1-ctl，其特征在于，它的结构如图2所示，它通过下述步骤构建得到：

（1）根据苜蓿尺蠖核型多角体病毒的ctl基因设计引物，以苜蓿尺蠖核型多角体病毒基因组DNA作为模板进行PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳及胶回收后，将ctl基因连入pMD18-T，形成含有ctl基因的重组质粒pMD18-T-ctl；

（2）利用SnaBI和BamHI将家蚕核型多角体病毒的Pie1启动子取代pFastBac1上原有的多角体基因启动子，得到pFastBac1-Pie1；用BamHI和KpnI切割重组质粒pMD18-T-ctl，回收ctl基因片段，克隆到pFastBac1-Pie1，构建含有ctl基因的中间载体pFastBac-Pie1-ctl。

2.一种抗菌剂，其特征在于通过下述步骤制得：

（1）将权利要求1所述中间载体pFastBac-Pie1-ctl转化含杆粒DNA的大肠杆菌DH10B菌株，经转座后，通过蓝白斑筛选含有重组杆粒的大肠杆菌，提取含ctl基因的重组杆粒DNA；用脂质体转染试剂将所述的重组杆粒DNA转染离体培养的昆虫细胞，收集含有ctl基因的重组病毒BV粒子的细胞培养液，作为重组病毒的种子液；

（2）以病毒种子液感染大量培养的昆虫细胞，感染3~5天后，离心收集细胞培养物的上清液，得到抗菌剂。