[发明专利]一种应用多重PCR阵列技术的核酸检测方法

权利要求书

1.一种引物对，含有通用标签序列(UT序列)，以及检测引物对，且UT序列加在每条检测引物的5’端；其中，所述UT序列由20-24个碱基组成，并满足以下条件：①上下游引物的UT序列不同、Tm值相差不超过±1℃，且大于检测引物Tm值5-10℃左右；②UT序列为随机设计的DNA片段，与待检测生物的核酸序列间无同源性。

2.权利要求1的引物对，其特征在于：所述UT序列由多组四个碱基组成的随机四聚体，该四聚体应满足：(1)四聚体间至少要有两个碱基是互不相同的；(2)四聚体之间不能彼此互补；(3)四聚体不应自身配对；(4)四聚体不能由两个重复碱基对组成。

3.权利要求1或2的引物对，其中UT序列由6组随机四聚体组成。

4.权利要求1或2的引物对，其中UT序列由以下6组随机四聚体组成：CAGC、GGTA、GACC、ACCT、ATCG、TGCG。

5.权利要求1或2的引物对，其中UT序列具体是：

F：CAGCGGT AGACCACCTATCGTGCG；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGAC；和/或

F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACC；

R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGAC；和/或

F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACC；

R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGAC。

6.权利要求1的引物对，其是：

F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGCCTGAATCTTCTGGTAAAAC；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACGTTTCTGGGCTGCCAAACATTAC；

和/或

F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGCATTATCACGGTAATTAGTG；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACAGAGCACTGTGCACTTAAG；和/或

F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGTAATGCTTTGATCGGCTT；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACTGGATTGCACTTCATCTTGG；和/或

F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGCAACCGTACAGAATGAAGCGG；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACTTATTCGTGCAATACTCGTGCG；和/或

F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGATTTCTGTAACAGCTACCAACGA；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACGAATTCCCTGTCTTTTCA AAGTC；

和/或

F                                                   ：

CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGGCCCTAATAAATTGGAGGATCTAATGA；

R                                                  ：

CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACGACCAGAAGTTGTATCTTTTTTTCCG；

和/或

F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACCGCTGCGGTAGGTGGTTCAA；

R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGACTTGTCGCGGATTTGCAACTA和/或

F                                                  ：

GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACCGCTGGCGCCGCTGGCAACAAAATTC；

R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGACCTTCTGCAGATTGCGGCGTGCCGT；

和/或

F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACCCGGCTCGTTTATCGGCTT；

R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGACGGTATTTCGTTTCAGCCAAGC；和/或

F                                                   ：

TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACCGAGTACCAAACTGCTAACACAGGTACT

C；

R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGACAGCTGGTTTGCAGCTTC；和/或

F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACCGCTGATTTAAGAGATAGAGGAACA；

R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGACTTTATGTGGTTATTTGCTGTC；和/或

F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACCTCCGCCTGCAAGTCCTAAG；

R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACTGGATTGCACTTCATCTTGG。