[发明专利]一种柑橘溃疡病菌拮抗细菌抑菌能力的测定方法无效
| 申请号： | 201210295782.7 | 申请日： | 2012-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN102766676A | 公开（公告）日： | 2012-11-07 |
| 发明（设计）人： | 易龙 | 申请（专利权）人： | 赣南师范学院 |
| 主分类号： | C12Q1/20 | 分类号： | C12Q1/20;C12R1/64 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 341000 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 柑橘 溃疡 病菌 拮抗 细菌 能力 测定 方法 | ||
1.一种柑橘溃疡病菌拮抗细菌抑菌能力的测定方法，其特征在于包括以下步骤：
(a) 将1.0 × 106 CFU/ mL的拮抗细菌新鲜菌液1 mL接种到盛有50 mL 的NB液体培养基的三角瓶中，28℃下180 r/min振荡培养72 h后，经12,000 r/min离心20 min，取上清液，经孔径为0.22 μm的微孔滤膜过滤除菌即得无菌滤液；
(b) 将直径10 mm的无菌滤纸片放入步骤(a)制得的无菌滤液中浸润20min；
(c) 将柑橘溃疡病菌配制为2.0 × 108 CFU/ mL的菌悬液，取2 mL菌悬液与冷却至50℃的200 mL NA培养基混匀，倒入直径90mm的培养皿制平板，每个平板20 mL；
(d) 往步骤(c)制得的含柑橘溃疡病菌的平板中央放入步骤(b)制得的浸润拮抗细菌无菌滤液的滤纸片，28℃培养48 h后，观察记录拮抗细菌对柑橘溃疡病菌的抑菌能力，测定抑菌圈直径。
2.根据权利要求1所述的柑橘溃疡病菌拮抗细菌抑菌能力的测定方法，其特征在于所述步骤(a)中，NB液体培养基组成为：牛肉浸膏3.0 g，酵母浸膏1.0 g，蛋白胨8.0 g，葡萄糖10.0 g，牛肉膏3.0 g，水1,000.0 mL, pH 值6.8-7.0。
3.根据权利要求1所述的柑橘溃疡病菌拮抗细菌抑菌能力的测定方法，其特征在于所述步骤(c)中，NA培养基组成为：牛肉浸膏3.0 g，酵母浸膏1.0 g，蛋白胨8.0 g，葡萄糖10.0 g，牛肉膏3.0 g，琼脂18.0 g，水1,000.0 mL, pH值 6.8-7.0。
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