[发明专利]一种IPTG诱导猪圆环病毒2型重组Cap蛋白表达的方法

权利要求书

1.一种IPTG诱导猪圆环病毒2型重组Cap蛋白表达的方法，其特征在于，具体步骤如下：

1）将pET28a-PCV2-ORF2原核表达载体，转化大肠杆菌DH5a，经过选择性培养、单克隆液体培养、PCR检测，选择带有目的条带的菌液提取质粒；

2）将提取的质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经过选择性培养、单克隆液体培养、PCR检测，选择带有目的条带的菌液，转接培养；

3）在转接培养的菌液中加入IPTG，在IPTG终浓度0.1-1.0mmlo/L条件下，10-37℃诱导猪圆环病毒2型重组Cap蛋白表达1-8小时；

4）取步骤3）不同条件制得的菌液，离心，弃上清液；

5）在沉淀中加入loading buffer混匀，沸水浴后迅速冷却；

6）离心，得到含有Cap蛋白的上清液。

2.根据权利要求1所述的一种IPTG诱导猪圆环病毒2型重组Cap蛋白表达的方法，其特征在于，所述的重组表达载体pET28a-PCV2-ORF2两次转化所用的培养基为SOC。

3.根据权利要求1所述的一种IPTG诱导猪圆环病毒2型重组Cap蛋白表达的方法，其特征在于，所述的选择性培养和单克隆液体培养采用的培养基均为LB+1‰Kana。

4.根据权利要求1所述的一种IPTG诱导猪圆环病毒2型重组Cap蛋白表达的方法，其特征在于，最佳诱导条件为IPTG终浓度0.6mmol/L，诱导温度30℃，诱导时间6h。