[发明专利]桑叶中具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物及用途

权利要求书

1.一种桑叶中具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物，其特征在于，通过以下步骤实现： 

（1）制备键合α-葡萄糖苷酶的磁珠：

（a）磁珠活化：取磁珠使用2-(N-吗啡啉)乙磺酸溶液清洗后加入1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐溶液和N-羟基琥珀酰亚胺溶液混合均匀，孵育活化30 min后移去上清液，并用2-(N-吗啡啉)乙磺酸溶液清洗；

（b）磁珠键合：在活化的磁珠上，加入含α-葡萄糖苷酶的2-(N-吗啡啉)乙磺酸溶液，震荡混合均匀在室温孵育30 min进行包被，移去上清液，再用磷酸盐缓冲液清洗包被的磁珠，弃去清洗液，待用；

（2）键合磁珠质量考察：将制备的键合磁珠分散在磷酸盐缓冲液中，使用扫描式电子显微镜对α-葡萄糖苷酶键合磁珠的表面分别进行扫描成像，检查磁珠键合情况，磁珠表面不粗糙、较光滑的表明键合情况良好；

（3）筛选具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物：

（a）具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物初筛：取30μl桑叶提取物水溶液2份，分别加到已分散在醋酸胺溶液的键合α-葡萄糖苷酶的磁珠和空白磁珠中，放在振荡器上混匀，孵育1 h，弃去上清液，再加入醋酸胺溶液清洗，弃去清洗液，最后使用含10%乙腈的醋酸胺溶液洗脱，取空白磁珠和酶键合磁珠的洗脱液进行液相分析及液质鉴定，洗脱液浓缩后，用氘代二甲基亚砜溶解，做核磁共振氢谱分析；

（b）目标化合物获取及活性验证：采用常规柱色谱分离技术分离获取目标化合物群，再采用制备液相色谱分离、纯化目标化合物或购置相对应的目标化合物；采用酶抑制活性实验验证纯化的目标化合物是否具有α-葡萄糖苷酶抑制活性，计算其半数抑制浓度。

2.根据权利要求1所述的一种桑叶中具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物，其特征在于，所述具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物为异槲皮素和紫云英苷。

3.根据权利要求1或2所述的一种桑叶中具α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物在制备抗糖尿病药物中的应用。