[发明专利]微生物环保剂

权利要求书

1.微生物环保剂，其特征是：包括沼泽红假单孢菌、枯草芽孢菌、德氏乳酸杆菌形成的混合菌和中药提取液；按重量比，沼泽红假单孢菌：枯草芽孢菌：德氏乳酸杆菌=3:4:7；按体积比，中药提取液在混合菌中的比例为1%-2%。

2.如权利要求1所述的微生物环保剂，其特征是：沼泽红假单孢菌，由下列步骤制备而成：

a. 制作摇瓶种子液：将经过驯化的沼泽红假单孢菌的单个菌落，接种到液体培养基中，于30℃培养48小时，得到摇瓶种子液；

所述的液体培养基为按下述比例配制的混合液：醋酸钠0.2克，氯化钠0.1克，硫酸镁0.1克，磷酸二氢钾0.05克，硫酸氨0.1克，氯化钙0.01克，100ml水，PH为6.6；121℃灭菌30分钟，冷却备用；

b．生产一级种子液：将步骤a得到的沼泽红假单孢菌摇瓶种子液以10%体积比的接种量，接种到沼泽红假单孢菌一级种子液体培养基在厌氧环境30℃培养72小时，光照强度为1000lx，菌数达30亿/ml，得到沼泽红假单孢菌一级种子液；

所述沼泽红假单孢菌一级种子液培养基为按下述比例配制的混合液：磷酸二氢钾1.0克，氯化钙0.1克，碳酸氢钙3克，醋酸钠1克，氯化钠1.0克，氯化镁0.5克，氯化胺1.0克，微量元素贮液1ml，生长辅助因子贮液1ml，水1000ml；PH=6.6，121℃灭菌30分钟，冷却备用；

所述的微量元素贮液为：氯化亚铁1800毫克，氯化钴250毫克，氯化镍10毫克，氯化铜10毫克，氯化锰70毫克，氯化锌100毫克，硼酸500毫克，锰酸钾30毫克，硒酸钠10毫克，水1000ml；

所述生长因子贮液为：生物素10毫克，尼克酸35毫克，硫氨素30毫克，对氨基苯甲酸20毫克，盐酸比多醛10毫克，泛酸钙10毫克，维生素B₁₂毫克，水100ml；

c．生产发酵（二级发酵）：将步骤b得到的沼泽红假单孢菌一级种子液以10%体积比接种到发酵培养液中，所述的发酵培养液同于步骤b的一级种子液培养基，培养条件同于步骤b，发酵96小时，检测活菌数已达到30亿/ml时停止发酵；

最后对沼泽红假单孢菌发酵液的活菌含量进行常规平板计数检测。

3.如权利要求1所述的微生物环保剂，其特征是：所述的枯草芽孢菌，由下列步骤制备而成：

d. 制作摇瓶种子液：将经过驯化的枯草芽孢菌的单个菌落，接种到液体培养基中，于30℃培养48小时，得到摇瓶种子液；

所述的液体培养基为按下述比例配制的混合液：蛋白胨1.0克，葡萄糖1.0克，牛肉膏1.0克，硫酸二氢钾0.5克，硫酸锰0.1克，水1000ml；PH=7.5；

e．生产一级种子液：将步骤d得到的枯草芽孢菌摇瓶种子液以3%体积比的接种量，接种到枯草芽孢菌一级种子液体培养基在厌氧环境30℃培养20小时，光照强度为1000lx，菌数达30亿/ml，得到枯草芽孢菌一级种子液；枯草芽孢菌一级种子液培养基与步骤d相同；

f．生产发酵（二级发酵）：将步骤e得到的枯草芽孢菌一级种子液以5%体积比接种到发酵培养液中，所述的发酵培养液同于步骤e的一级种子液培养基，培养条件同于步骤e。