[发明专利]一种精制谷胱甘肽发酵液的方法无效
申请号: | 201210313822.6 | 申请日: | 2012-08-20 |
公开(公告)号: | CN102827244A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 陈健辉;朱义福;饶汉生;江燕斌;马建;郑凝坚 | 申请(专利权)人: | 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司;华南理工大学 |
主分类号: | C07K5/037 | 分类号: | C07K5/037;C07K1/16 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 罗晓林 |
地址: | 526040 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 精制 谷胱甘肽 发酵 方法 | ||
1.一种精制谷胱甘肽发酵液的方法,其特征在于包括步骤如下:
(1)样品的预处理:对发酵菌种经过破壁处理后的谷胱甘肽抽提液进行离心、超滤处理,再用大孔吸附树脂对其初步纯化处理得预洗脱液,收集并浓缩预洗脱液得到谷胱甘肽粗品;
(2)调节粗品pH:用0.1mol/L的盐酸溶液调节步骤(1)所得的谷胱甘肽粗品的pH值为3.0~3.5;
(3)参数设置和进样:设置制备型液相色谱的操作参数,扫描波长为210±10nm,扫描时间为60±5min,同时对流动相流速及流动相组分进行设定,基线水平后进样,经制备型液相色谱分离后得洗脱液;
(4)收集洗脱液:当响应值大于100mAU后开始收集流出的洗脱液,并对每个响应峰分别收集,用亚硝基铁氰化钾法对收集液进行定性判断,收集谷胱甘肽高峰液。
2.根据权利要求1所述的制谷胱甘肽发酵液的方法,其特征在于:步骤(1)得到的谷胱甘肽粗品浓度优选为5g/L~10g/L,以质量百分比计,经过步骤(1)得到的谷胱甘肽粗品纯度为45%~55%。
3.根据权利要求2所述的精制谷胱甘肽发酵液的方法,其特征在于:步骤(3)中,所用的流动相是甲醇溶液,其浓度为5%~10%。
4.根据权利要求3所述的精制谷胱甘肽发酵液的方法,其特征在于:步骤(3)中,所用流动相流速为3mL/min~5mL/min。
5.根据权利要求4所述的精制谷胱甘肽发酵液的方法,其特征在于:步骤(4)中,收集谷胱甘肽高峰液区域为13min-20min。
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