[发明专利]一种从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法

权利要求书

1.一种从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，具体步骤如下：

1）溶解萃取：在鸭胆膏粗品中加入萃取剂，具体为鸭胆膏粗品5倍重量的氯仿、5~20倍重量的甲醇、5~10倍重量的水，加热回流1~2小时，冷却至20~25℃，静置分层，得到氯仿相和甲醇/水相，蒸发回收甲醇，剩下的水相以质量百分含量17~20%的盐酸调pH至2，结晶，离心，得到鹅去氧胆酸A品；

2）乙酸乙酯萃取：将鹅去氧胆酸A品用5~10倍质量的氢氧化钠溶液溶解，溶液中氢氧化钠的质量百分含量为5~10%，冷却至20~25℃，加入乙酸乙酯，加入量为每克鹅去氧胆酸A品加5~10ml，调pH至7.2~7.6，分层得到乙酸乙酯相，向水层中继续加入乙酸乙酯，加入量为每克鹅去氧胆酸A品加5~10ml，调pH至6.8~7.2，分层得到乙酸乙酯相，合并两次乙酸乙酯相，加入鹅去氧胆酸A品5%重量的活性炭回流脱色1~2小时，过滤除去活性炭，蒸发回收乙酸乙酯，剩下即为鹅去氧胆酸B品；

3）超滤除杂：取鹅去氧胆酸B品溶解到10~20倍重量的水中，以过截留分子量为3K-100K的超滤膜后，用质量百分含量17~20%的盐酸调节pH至2~3，过滤干燥得到白色的鹅去氧胆酸。

2.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤1）所述的鸭胆膏粗品的制备方法为：新鲜的鸭胆汁，按50g/L加入氢氧化钠，煮沸24小时进行皂化，以质量百分含量38%的浓盐酸调pH至2，结晶，得到膏状物，将膏状物用10~20倍质量的乙醇溶解，加入膏状物重量10%的活性炭脱色2小时，过滤除去活性炭，蒸发回收乙醇，浓缩得到鸭胆膏粗品。

3.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，所述鸭胆膏粗品可用同质量钙盐法制备得到的鹅去氧胆酸粗品替代，其制备方法为：新鲜的鸭胆汁，按胆汁量50g/L加入氢氧化钠，煮沸24小时进行皂化，后加入胆汁重量5%的氯化钙，析出总胆酸钙盐沉淀，离心弃去滤液，总胆酸钙盐用40倍质量的水清洗，弃去不溶物，水溶液用用质量百分含量17~20%的盐酸调pH至2，析出鹅去氧胆酸粗品，过滤，干燥，得到鹅去氧胆酸粗品。

4.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤1）所述的在鸭胆膏粗品中加入萃取剂，为加入鸭胆膏粗品5倍重量的氯仿、10倍重量的甲醇、5倍重量的水；所述的加热回流，时间为2小时。

5.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤2）所述的将鹅去氧胆酸A品用氢氧化钠溶液溶解，为加入鹅去氧胆酸A品5倍质量的氢氧化钠溶液，冷却至25℃。

6.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤2）先后两次加入乙酸乙酯的量分别为每克鹅去氧胆酸A品的加入10ml乙酸乙酯和每克鹅去氧胆酸A品的加入5ml乙酸乙酯。

7.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤2）所述的调pH为用醋酸调节，先后两次分别调pH为7.5和6.8。

8.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤2）所述的活性碳活性炭回流脱色，回流脱色时间为1小时。

9.根据权利要求1所述的从鸭胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，步骤3）所述的取鹅去氧胆酸B品溶解到水中用水量为鹅去氧胆酸B品重量的15倍；所述的超滤膜截留分子量为10K的超滤膜。